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益生菌对肝硬化大鼠肝细胞凋亡的干预作用

2014-09-12李延玲张怀宏翟玉峰

中国老年学杂志 2014年3期
关键词:剂量模型

李延玲 张怀宏 翟玉峰

(南阳市中心医院,河南 南阳 473000)

肝硬化的发生发展过程中,肠道菌群失衡产生的肠源性内毒素具有重要的作用,两者相辅相成〔1〕。因此,通过调整肠道菌群以改善肝硬化患者的症状、预防肝硬化并发症的发生等成为研究的热点。世界卫生组织把益生菌定义为摄取一定数量后能对机体产生有益作用的微生物〔2〕。益生菌已被用于治疗多种临床疾病。本实验探讨益生菌对肝硬化大鼠肝细胞凋亡的干预作用。

1 材料与方法

1.1材料 健康SD雄性大鼠50只,180~250 g,由浙江中医学大学动物实验中心提供。益生菌(含双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、肠球菌三联活菌),上海信谊药业有限公司,规格:210 mg/胶囊,含活菌5×107CFU/g(CFU:活菌含量)。四氯化碳(CCl4),上海申翔化学试剂有限公司;丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒、天冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒均购于南京建成生物工程研究所;TUNEL检测试剂盒,兔抗鼠Bax抗体、兔抗鼠Bcl-2抗体、磷酸盐缓冲液均购自武汉博士德生物工程有限公司,PV6003两步法检测试剂盒、DAB显色试剂盒均购自北京中杉公司。高速低温离心机,电热恒温水浴箱(上海医用恒温设备厂),电子分析天平,玻璃匀浆器。

1.2肝纤维化动物模型的建立 采用橄榄油将CCL4配制成40%油剂,3 ml/kg皮下注射(首次5 ml/kg),1次/3 d,连续42 d。并饲以高脂低蛋白食物(玉米面混以0.5%胆固醇),30%酒精为唯一饮料〔3〕。将50只SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、益生菌低、中、高剂量组,每组10只。正常组皮下注射橄榄油2次/w,同时每天予等容量蒸馏水灌胃;……

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