张 璐，王延群，郝立沙，高明明，李爱东，陶 冶，李 莉，涂亚斌，蔡雪辉*，路义鑫*

(1.东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨 150030；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心，黑龙江哈尔滨 150001）

猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位鉴定

张 璐1，王延群2，郝立沙2，高明明2，李爱东2，陶 冶2，李 莉2，涂亚斌2，蔡雪辉2*，路义鑫1*

(1.东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨 150030；2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物疫病诊断中心，黑龙江哈尔滨 150001）

为制备猪圆环病毒2型(PCV2）Cap蛋白单克隆抗体(MAb）及鉴定其抗原表位，本研究采用PCV2去核定位信号Cap蛋白(dCap），通过杂交瘤技术制备1株杂交瘤细胞株(4E2），制备小鼠腹水效价达1∶64 000，亚类鉴定为IgG1/κ链。Western blot分析显示，该株MAb与毕赤酵母表达的dCap和原核表达的Cap蛋白均可以发生特异性免疫反应。采用肽扫描法对MAb的非核定位信号区进行抗原表位鉴定，结果表明该MAb可以识别的线性表位区域为131TKATALTYDPYVNYSS146。本实验结果为进一步研究Cap蛋白的结构和PCV2临床检测方法的建立奠定基础。

猪圆环病毒2型；dCap；单克隆抗体；表位

猪圆环病毒(Porcine circovirus，PCV）可以分为两种血清型，即PCV1和PCV2[1]，其中只有PCV2具有致病性，可以导致猪群继发感染其他病原并可以产生免疫抑制病。当前普遍认为PCV2是引起仔猪断奶多系统综合征(PMWS）的主要原因[2]。

PCV2为单股环状DNA病毒，全长为1 766 nt～1 768 nt，其中包含两个开放阅读框(ORFs）：ORF1编码该病毒的非结构蛋白Rep和Rep'，参与病毒的复制；ORF2编码该病毒唯一的结构蛋白Cap蛋白。……