徐义刚，李丹丹，刘忠梅，吴 岩，魏冬旭，李苏龙*

(1.黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心，黑龙江哈尔滨 150001；2.海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，海南海口 570125）

基于DPO引物的空肠弯曲菌PCR检测方法的建立与初步应用

徐义刚1，李丹丹2，刘忠梅1，吴 岩1，魏冬旭1，李苏龙1*

(1.黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心，黑龙江哈尔滨 150001；2.海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，海南海口 570125）

为建立特异、快速检测空肠弯曲菌的方法，本研究针对其gyrA基因设计了一对双启动寡核苷酸引物(DPO），建立了空肠弯曲菌DPO-PCR检测方法。试验结果显示，该方法的检测下限为1.2×102cfu/mL，在48℃～68℃退火温度范围内均可高效扩增靶基因片段，表明该方法退火温度范围宽，同时DPO引物特异性强，PCR反应过程中不会产生非特异性扩增。利用该方法对采集的184份样品进行检测，共计检出17份空肠弯曲菌阳性样品，经国标法(GB/T 4789.9-2008）复验，两者检测结果一致，显示了良好的实用性。该DPO-PCR方法设计简单、特异性强，为致病微生物的快速准确检测提供了新方法。

空肠弯曲菌；gyrA基因；DPO-PCR

空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni）是一种重要的人畜共患病致病菌，也是一种危害严重的食源性致病菌，引起人类细菌性腹泻的暴发流行或集体性食物中毒，严重时可引起周围神经自身免疫性疾病—格林 -巴利综合症(Guillain-barre syndrome）[1-2]。C.jejuni广泛存在于各种动物体内，尤以家禽、野禽和家畜带菌最多，并且多为无症状带菌，是重要的传染源和贮存宿主[3]，人类主要通过与带菌动物接触或食用被污染的食品而感染发病，患病者多为儿童[4-5]。……