齐春胜 高森 李会强 高卫真

肺癌的治疗是以手术、放疗和化疗为主的综合治疗，化疗通过给予药物以杀死肿瘤细胞，一般与手术和放疗联合使用。顺铂是一种常见的化疗药物，可通过使DNA发生交联，抑制癌细胞的DNA复制和转录，使肿瘤细胞停止生长发生凋亡[1]。但临床实际中，肿瘤细胞往往对化疗药物产生耐受，使治疗失效。因此，查找肿瘤的耐药机制，开发新的逆转耐药性的方法，对提高临床患者的受益有十分重要的意义。目前的研究[2,3]显示，肿瘤细胞产生耐药的机制包括减少药物的吸收，通过转运蛋白增加药物的外排，通过谷胱甘肽系统对抗肿瘤药物进行解毒，凋亡途径异常以减少肿瘤细胞的凋亡等。

异长春花碱（Vinorelbine）是一种新型抗肿瘤药，在一系列临床前研究中发现其可抑制肿瘤细胞的生长，促进细胞凋亡，抑制肿瘤转移[4]。而异长春花碱逆转顺铂耐受肺癌细胞的作用尚未得到充分研究，本研究拟对其作用和分子机制进行初步的探讨。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与仪器 人肺癌细胞系A549和A549/DDP购自中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所；细胞培养基购自Gibco公司；异长春花碱购自Sigma公司；顺铂购自Sigma公司；Rhodamine-123（Rh-123）购自Sigma公司；非放射性细胞增殖检测法（MTS）试剂、real-time PCR试剂盒购自Promega公司；细胞凋亡检测试剂盒购自BD Biosciences；抗MDR1（multidrug resistance protein 1）、Bcl-2、caspase-3/8、survivin、PTEN（Phosphatase and tensin homolog）和p-AKT单抗均购自SantaCruz公司；NF-κB、Twist和Snail的转录活性报告基因检测试剂盒购自Promega；ECL免疫印迹底物试剂盒购自Millipore公司；流式细胞仪CaliburTM：BD公司；酶标仪和PCR仪：Thermo公司。……