抑癌基因TCF21对肺癌细胞A549增殖、凋亡和迁移的影响

2014-09-09胡松阳诺陈铭伍郭建极冼磊

中国肺癌杂志 2014年4期

胡松阳诺陈铭伍郭建极冼磊

肺癌是临床常见恶性肿瘤，并且有着最高的癌症相关死亡率[1]。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）是最常见的肺癌类型，约占到了肺癌的85%[2]。由于75%的肺癌患者在确诊时已经有局部或者远处转移，因此肺癌患者总的5年生存率非常低[3]。对肺癌发生的可能分子机制研究有限，是肺癌早期诊断率低和患者预后不良的重要原因之一。

抑癌基因的失活会导致肿瘤的形成和恶性转化。目前，许多研究[4-10]表明，抑癌基因的失活在肺癌的发生发展中扮演着重要角色。转录因子21（transcription factor 21,TCF21）是一个新发现的抑癌基因，它在多种肿瘤中因存在启动子区甲基化，而导致TCF21在癌组织中的表达较癌旁组织降低[11-13]。前期研究[14]表明TCF21在肺癌中低表达，这与其启动子区甲基化程度升高有关。而这种表达降低对肺癌的发生发展有何意义，目前尚无相关报道。

慢病毒载体可以整合、携带目的基因，并侵染靶细胞，利用这一技术可以在靶细胞中大量表达目的基因。使用携带有绿色荧光蛋白基因的慢病毒转染细胞，可以通过观察绿色荧光蛋白的表达来初步判断慢病毒转染细胞的转染效率。基于本课题组前期组织水平的研究结果，本研究从细胞水平探索TCF21的生物学功能。利用慢病毒转染技术在肺癌细胞A549中高表达TCF21，用荧光定量PCR和Western blot技术检测TCF21基因的mRNA和蛋白的表达水平。在确定高表达成功后，利用MTT实验、Transwell、流式细胞术检测TCF21过表达对肺癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响。