张海鸽

6MV-X线对人食管癌细胞系EC-9706Bcl-2基因表达的影响

张海鸽

目的 研究X线对人食管癌细胞系EC-9706 B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)基因表达的影响。方法 采用RT-PCR法测人食管癌细胞系EC-9706经0、4、6 Gy的X线照射后1、6、24 h Bcl-2基因表达的变化。结果 X线照射可以显著降低人食管癌细胞株EC-9706Bcl-2基因的表达。结论 X线照射人食管癌细胞系EC-9706细胞后Bcl-2基因的表达在0～6 Gy无剂量依赖性, 在不同的时间点上Bcl-2的表达稳定。

人食管癌细胞系；Bcl-2；RT-PCR

食管癌是一种常见的消化道恶性肿瘤, 放疗是主要的治疗方法之一。放疗的主要机制是诱导细胞凋亡。Bcl-2是目前发现的抗凋亡作用最强的基因之一, Bcl-2的高表达可以抑制正常细胞或肿瘤细胞的凋亡。本文采用RT-PCR法检测X线作用后Bcl-2基因表达的变化, 进而探讨该基因与食管癌放疗敏感性之间的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 RPMI-1640培养液, 标准胎牛血清、胰蛋白酶、TRIzolR Reagent、PCR反应试剂盒、PCR引物、反转录试剂盒、GAPDH基因、Bcl-2基因、培养皿35 mm×10 mm。仪器设备：水套式CO2培养箱、置显微镜、紫外分光光度计、实时定量PCR仪、台式高速离心机、低温离心机、PE管、PCR反应管。人食管癌细胞系EC-9706购自中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室。

1.2 方法

1.2.1 将细胞培养至对数期, 制备单细胞悬液, 以2×106个细胞分别接27个培养皿中, 注意尽量使细胞分散均匀, 将27个培养皿置入培养箱内培养24 h后分成三组。以酒精消毒医用直线加速器治疗床, 铺双层湿毛巾补偿厚度使总厚度达到1.5 cm, 培养皿置于其上, 以0、4、6 Gy的6MV-X线分别照射, 照射时培养皿置于照射野边缘2 cm以内, 机头旋转180°,射线从下方入射, 剂量率2 Gy/min。……