周明霞，贺 靖，王洁琼，李 浩，施佳辰，安玉会

(郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，河南 郑州 450052)

灵芝L08对CD34+肝癌SMMC-7721细胞增殖及CD34表达的影响

周明霞，贺 靖，王洁琼，李 浩，施佳辰，安玉会

(郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室，河南 郑州 450052)

目的探讨灵芝L08对CD34+肝癌SMMC-7721细胞增殖及其CD34蛋白表达的影响。方法培养肝癌SMMC-7721细胞，并用灵芝L08处理，MTT法测定细胞增殖情况，流式细胞术测定肝癌SMMC-7721细胞中CD34+肝癌SMMC-7721细胞数量，Western blot法测定CD34蛋白的水平。结果灵芝L08处理肝癌SMMC-7721细胞后，细胞增殖率及CD34+肝癌SMMC-7721细胞数量都有所降低，CD34+肝癌SMMC-7721细胞的CD34蛋白表达水平也降低(P<0.05)。结论灵芝L08能抑制CD34+肝癌细胞的增殖及CD34蛋白的表达。

灵芝；肝癌SMMC-7721细胞；CD34；细胞增殖

目前，肝癌总体治疗效果仍不理想，而导致其治疗困难、病死率高的主要原因就是治疗后肿瘤的复发和转移。L08是本实验室从灵芝中提取出的三萜类化合物，可诱导肿瘤细胞的凋亡，具有极大的抗肿瘤潜力[1]。本研究旨在观察灵芝L08对CD34+肝癌SMMC-7721细胞增殖及其CD34蛋白表达的影响，为灵芝L08应用于肝癌临床治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1材料L08(自制)；胎牛血清、DMEM高糖细胞培养基(美国Hyclone公司)；环磷酰胺(天津金世制药有限公司)；链霉素-青霉素双抗(美国Amresco公司)；胰蛋白酶(美国Gibco公司)；DMSO、MTT试剂(美国Sigma公司)；兔抗人CD34单克隆抗体、羊抗兔IgG-HRP(北京中杉金桥生物技术有限公司)。

1.2细胞培养及药物处理肝癌SMMC-7721细胞采用体积分数10%胎牛血清及质量分数1%双抗的DMEM高糖培养基置于37 ℃，体积分数5% CO2培养箱中培养，常规换液传代。取对数生长期细胞进行96孔铺板，待细胞过夜贴壁后，分别用不同浓度(100、300、500 mg·L-1)L08处理细胞24 h、48 h、72 h后MTT法测定细胞增殖情况。……