彭勇+陈伟宁

[关键词]结核；T SPOT.TB试验；心包积液

中图分类号：R542.1+2文献标识码：B文章编号：1009_816X（2014）03_0260_02

doi：10.3969/j.issn.1009_816x.2014.03.36结核感染T细胞斑点试验（T_SPOT.TB）通过酶联免疫斑点技术（ELISPOT）检测外周血中经结核菌特异性抗原刺激后释放γ干扰素的T细胞，诊断结核分枝杆菌感染具有较高的敏感性和特异性，本文主要针对我院收治的高度怀疑结核性心包积液患者的外周血液行ELISPOT检测，探讨该方法对结核性心包积液的诊断价值。

1资料与方法

1.1一般资料：选取我院2011年11月至2013年11月住院患者48例，根据以下标准，将患者分为两组：观察组拟诊结核性心包积液组21例，其中男12例，女9例，年龄16～72（38.9±13.5）岁，包括结核杆菌培养阳性、或结核杆菌培养阴性，但临床表现、影像学检查疑似结核，抗结核治疗有效的患者；对照组27例，其中男15例，女12例，年龄14～75（48.3±18.7）岁； 其中7例非结核感染性渗出性心包积液、8例癌性心包积液（肺癌5例、淋巴瘤1例、乳腺癌2例） 、11例与心力衰竭有关、1例与肾上腺功能减退有关。所有病例均排除HIV感染。

1.2方法：

1.2.1T_SPOT.TB检测：根据T_SPOT.TB试剂盒（Oxford Immunotec，Oxford UK）操作。肝素抗凝管采集6ml外周静脉血，样本室温（15～25℃）保存与运输，样本采集后尽早（24小时内）送到杭州市艾迪康医学检验中心。密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMCs）。洗涤后进行细胞计数。PBMCs和结核特异性抗原同时加入包被抗体的反应孔中，孵育过夜（37℃，5% CO2），效应T淋巴细胞释放细胞因子，与预包被的抗体结合。洗板，加入二抗，孵育1小时。洗板，加入底物显色液孵育7分钟。蒸馏水终止反应。一个斑点代表一个效应T淋巴细胞。

1.2.2结果判定：根据T SPOT.TB试剂盒使用说明书。……