陈 思，罗光彬，王辉田，孙 超

（沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁 沈阳 110161）

体细胞核移植是将供体细胞核移入去核的卵母细胞中，使后者不经精子穿透等有性过程即被激活、分裂并发育，让核供体的基因得到完全复制，经过体外培养后，将发育良好的胚胎移植到动物体内的技术[1]。近年来，体细胞克隆猪在建立人的动物疾病模型和人类器官移植，进行基因工程药物生产和临床医学克隆治疗等方面具有巨大的应用潜力，己成为当今体细胞克隆研究的热点。尽管猪体细胞核移植已经取得了很大的进展，但移植效率依然很低，只有少量的重构胚胎能最终发育成为克隆动物；这是因为在猪的体细胞核移植过程中，实验操作步骤繁琐，影响因素较多，任何一个操作步骤和制约因素都将导致效率的降低或移植失败。为了提高猪体细胞核移植效率，有必要对猪体细胞核移植过程中的关键技术环节进行分析和优化，对影响猪体细胞核移植的因素进行探讨研究。

1 国内外猪体细胞克隆的研究现状

1997“多莉”羊诞生，揭开了体细胞克隆的序幕，2000年，Polejaeva等得到首例体细胞克隆猪之后，Onishi和Bet-thauser等相继分别成功地得到了体细胞克隆猪，2003年，Sanghwan等克隆出了表达强荧光蛋白的转基因猪，Jagdeece等克隆出了敲除α-1，3-半乳糖苷转移酶基因的克隆猪，从而为人类培育异种器官移植猪跨进了一大步。在国内，李宁教授已于2005 年成功培养出我国首例克隆猪[2]；窦忠英等用胚胎细胞核移植产生6头猪；……