CTRP3下调炎症因子表达改善胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性*
2014-08-13吴玉文孙苏欣孙家忠
李 新, 姜 黎, 杨 杪, 吴玉文, 孙苏欣, 孙家忠
(武汉大学中南医院1内分泌科, 2综合科, 湖北 武汉 430071)
现有研究表明,脂肪组织已经不仅仅是胰岛素作用的靶器官与能量储备组织,而是具有多种生物学功能的内分泌器官。脂肪细胞或脂肪组织分泌的活性分子被称为脂肪因子,参与体内糖脂代谢、炎症反应、动脉粥样硬化、胰岛素信号转导以及胰岛β细胞功能调控等多个病理生理过程,成为联系肥胖与2型糖尿病的重要因素。胰岛素抵抗是一个慢性亚临床炎症过程,肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6 等多种炎症因子可以降低机体对胰岛素的敏感性[1]。
C1q/TNF相关蛋白3(C1q/TNF-relatedprotein3,CTRP3)是新近发现的一种脂肪因子,与脂联素同属C1q/TNF超家族,具有降糖、抗炎、抑制肝糖异生、促进内皮细胞增殖与迁移等效应[2-5]。但是CTRP3对脂肪组织胰岛素敏感性的效应目前并不清楚。因此,本研究通过体外培养3T3-L1脂肪细胞,以软脂酸(palmicacid,PA)诱导胰岛素抵抗的3T3-LI脂肪细胞模型,观察CTRP3对胰岛素抵抗的脂肪细胞葡萄糖摄取率、TNF-α及IL-6表达、葡萄糖转运子4(glucosetransporter4,GLUT-4) 表达等的效应,探讨CTRP3对脂肪细胞胰岛素敏感性的调节效应及可能机制。
材 料 和 方 法
1 细胞与试剂
小鼠3T3-L1前脂肪细胞(来源于美国菌种保藏中心,购自中国科学院上海生命科学研究院);DMEM高糖培养基(Gibco);胎牛血清、牛血清白蛋白、0.25%胰蛋白酶、青/链霉素、异丁基-甲基-黄嘌呤(IBMX)和油红O(Sigma);地塞米松(dexmethasone,DEX)、KRP缓冲液(131.2mmol/L NaCl、4.71 mmol/L KCl、2.47 mmol/L CaCl2、2.48 mmol/L Na3PO4、1.24 mmol/L MgSO4,10 mmol/L HEPES,pH 7.4)、2-脱氧-[3H]-葡萄糖(武汉楷伦化学新材料有限公司);重组人胰岛素(诺和公司);重组CTRP3蛋白(BioVendor);小鼠TNF-α及IL-6 ELISA检测试剂盒(武汉中帜生物科技有限公司);……
