郭守东， 冯 蕾， 张 颖， 崔英杰， 秦树存

(泰山医学院山东省高校动脉粥样硬化重点实验室， 山东 泰安 271000)

近年研究显示，脂蛋白自身结构的改变是影响其功能的生物学机制之一，且脂蛋白自身结构改变而失去原有功能的现象在多种疾病中普遍存在[1-3]。脂蛋白糖基化修饰是最重要的蛋白质翻译后修饰之一，其对于维持脂蛋白的功能至关重要。有研究证实，脂蛋白的唾液酸化修饰，主要是指N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid, NANA)化修饰，以及半乳糖、甘露糖等糖基构成对维持脂蛋白的正常生理功能十分重要；另有研究显示，脂蛋白等的去唾液酸化与动脉粥样硬化等心血管病变的发生和发展密切相关[4-6]。因此，脂蛋白单糖组成的精确测定是探究脂蛋白糖基化修饰与脂蛋白功能的重要技术手段之一。

测定单糖组成的方法主要包括高效液相色谱法、气相色谱法和液相串联质谱法等。由于糖类紫外吸收很弱，为提高检测灵敏度，研究者常将糖复合物水解后采用柱前或柱后衍生化色谱法分离和检测。1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5- pyrazolone，PMP)柱前衍生化高效液相色谱法反应条件较温和，产物无立体异构，紫外检测灵敏度较高，可用于同时检测中性、酸性及碱性单糖。本文建立一种高效液相色谱法测定脂蛋白上的中性和碱性单糖的PMP柱前衍生方法，结合串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)快速定量脂蛋白颗粒上的NANA，并对糖尿病患者和健康人脂蛋白颗粒的单糖构成进行比对分析。

材 料 和 方 法

1 材料……

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