王 颖，张永国，侯伟波，王海英，喻 田

(遵义医学院 麻醉系， 贵州 遵义 563099)

经皮腔内冠脉血管成形术、冠脉搭桥术虽能使缺血心肌重新获得血流供应而挽救生命，但伴随着强烈的氧化应激反应，加重心脏损伤，即为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI)。吡那地尔为吡啶氰胍类非选择性钾通道开放剂，能预防和减轻心肌缺血症状，缩小心肌梗死面积[1-3]，对缺血再灌注心肌起到保护作用。本研究通过采用langendorff离体心脏灌注系统，从微观角度观察，吡那地尔后处理对缺血/再灌注离体大鼠心脏的超微结构及线粒体评分的影响，为深入研究吡那地尔后处理心肌保护机制提供依据，为临床应用奠定实验基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物 年龄为15～18周健康雄性SD大鼠，250～300g，8～9周龄，清洁级(第三军医大学大坪医学院动物中心提供，证书号：SCXK(渝)2012-0005)。

1.2 实验试剂 吡那地尔(Sigma公司，美国)；Krebs-Henseleit灌注液(K-H液)：(单位 mmol /L)NaC1 118.0、KC1 4.7、KH2P041.2、MgSO41.2、NaHCO325.0、CaC121.25、Glucose 10.0；Tomas停跳液：(单位 mmol /L) NaC1 118.0、KC1 4.7、NaHCO325.0、CaC121.25、MgCl2·6H20 219.08(国产分析纯)。

1.3 实验仪器 BS224S 电子天平(sartorius公司，德国)；去离子水处理器(Milli QA，美国)；CyberScan 310型pH计(优特EUTECH 新加坡公司，美国)；powerlab生物信号采集系统、langendorff 离体心脏灌注系统(澳大利亚)；透射电子显微镜(日立H7500日本)。

1.4 实验方法

1.4.1 建立模型 将麻醉后(肝素 250/kg、1%戊巴比妥钠 40 mg /kg，腹腔)大鼠固定，迅速开胸取心脏置于K-H液中(4 ℃，pH 7.35～7.45)，排除血液，固定主动脉于Langendorff灌注针，充氧后K-H液(37 ℃，pH 7.35～7.45)持续逆行灌注，剪开肺动脉降低肺动脉压，去除左心耳，将球囊传感器沿左心房插入左心室固定，调整灌注压在70～80 mmHg，左室舒张末压在4～8 mmHg，平衡20 min后，心率>250次/min、左室发展压≥80 mmHg、室性早搏≤2个/min，建模成功。

1.4.2 实验分组 将24个成功模型随机分为4组，每组6只：正常组(N) 持续K-H液灌注120 min；缺……