洪丽霞,吕红霞,石明芯,王佳慧,代晶(成都医学院药学院,成都 610083)

·论 著·

HPLC法测定大鼠肝微粒体中UGT酶的底物

洪丽霞,吕红霞,石明芯,王佳慧,代晶*
(成都医学院药学院,成都 610083)

目的 建立测定大鼠肝微粒中UGT酶底物的HPLC方法。方法 选择对硝基酚、对乙酰氨基酚作为UGT的特异性底物。采用高效液相色谱法,分别以非那西丁、咖啡因作为内标,色谱柱为 Welchrom C18,体积流量为1 mL/min,柱温为30 ℃。对硝基酚和对乙酰氨基酚的流动相分别为乙腈-0.01 mol/L的醋酸铵缓冲液(pH 5.00)=35∶65和乙腈-水=14∶86, 对应的检测波长分别为316 nm和244 nm。 结果 对硝基酚和对乙酰氨基酚在0.5～100 μmol/L范围内,线性关系良好。对硝基酚的日内精密度和日间精密度RSD%﹤14.7%,方法回收率为89.9%～111.0%,提取回收率>86.5%。对乙酰氨基酚的日内精密度和日间精密度RSD%﹤13.0%,方法回收率105.6% ～114.2%,提取回收率>78.3%。结论 两组方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中UGT酶活性的测定。

高效液相色谱法；尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶；对硝基酚；对乙酰氨基酚；肝微粒体

尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT) 是生物体内重要的Ⅱ相代谢酶,其主要作用是催化内源及外源化合物进行葡萄糖醛酸结合反应,增加其极性,便于随尿及胆汁排出体外。 UGT广泛分布于肾脏、脑、皮肤、肠、脾、胸腺、心脏等组织,其中以肝脏中该酶的活性最高[1]。在药物的Ⅱ相代谢反应中,这种反应占到35%[2],因此研究药物与UGT 酶的关系,对药物相互作用、解毒排毒机制的研究具有十分重要的意义。本文选择对硝基酚、对乙酰氨基酚为UGT底物[3,4], 建立测定大鼠肝微粒体中UGT酶底物的HPLC法。该方……