基于差异蛋白质鉴别僵蚕及其新型伪品
2014-08-09汪云伟程元柳吴纯洁万德光国锦琳
邱 乙,汪云伟,程元柳,吴纯洁,万德光,国锦琳
(成都中医药大学 中药材标准化教育部重点实验室中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地,成都611137)
僵蚕为蚕蛾科昆虫家蚕BombyxmoriLinnaeus 4~5龄的幼虫感染(或人工接种)白僵菌Beauveriabassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体[1]。具有息风止痉,祛风止痛,化痰散结之功效[2]。据统计,在我国513种常用成药中,含有僵蚕的有49种,其中64种儿科成药中,有29种含有僵蚕[3]。僵蚕每年我国需求量在400吨以上,且常年外销出口。传统的伪品僵蚕大多为用石灰水将死家蚕掺白加工而成[4],也有将地蚕冒充正品僵蚕使用[5]。近年来,出现了新的伪品黑死蚕和空心僵蚕,由于外观、显微等均与正品相似,难以应用常规方法进行有效鉴别。僵蚕作为典型的动物药,主要药理活性成分为蛋白质[6]。蛋白质有严格的种属特异性和组织特异性[7-8]。国际种子检验协会将蛋白质电泳方法正式定为标准的品种鉴定方法,表明了蛋白质电泳方法在种子鉴定和纯度检测中的地位。同时蛋白质在体内以及不同部位间都具有稳定的含量,因此僵蚕的鉴别可以选择其差异蛋白作为鉴别的基础。本研究比较了僵蚕与伪品间蛋白质含量差异,并通过SDS-PAGE的方法初步寻找差异蛋白条带对僵蚕与伪品进行了鉴别,基于寻找的特有蛋白可有效的对僵蚕进行真伪鉴别。
1 材料与仪器
僵蚕、空心僵蚕、黑死蚕均购自广元市苍溪县,经成都中医药大学国锦琳副教授鉴定僵蚕为蚕蛾科昆虫家蚕BombyxmoriLinnaeus4~5龄的幼虫感染(或人工接种)白僵菌Beauveriabassiana(Bals.)Vuillant而致死的干燥体;……
