徐 岩，许佳明，何 璐，姬朝光，黄晓巍*

(1.长春中医药大学，长春 130117；2.吉林大学基础医学院，长春 130021)

鹿茸多肽是从新鲜鹿茸中提取的一类多肽类物质，具较强的生物活性，鹿茸多肽具促进细胞修复，诱导细胞分化等多重作用[1]，并具有抗肿瘤等作用[2]。尽管鹿茸多肽抗肿瘤的确切机制尚不十分清楚，但研究表明，鹿茸多肽的抗肿瘤作用可能通过不同的信号传导通路，抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤新生血管形成，抑制肿瘤细胞侵袭和转移。鹿茸多肽对人胶质瘤细胞的增殖抑制作用及细胞周期调节作用未见报道。

1 材料与方法

1.1 材料 细胞系，人胶质瘤细胞(U251)肿瘤细胞系由吉林大学免疫学系保存；鹿茸多肽，长春中医药大学附属医院实验中心提供；碘化丙啶PI(美国Sigma公司)，以PBS配制成1.0 mg/mL浓度，过滤除菌后避光备用；MTT(美国Gibco公司)，临用前以PBS配制成5 mg/mL浓度，过滤除菌后避光备用；二甲基亚砜DMSO和0.25%胰蛋白酶(美国Amresco公司)；RPMI-1640(美国Gibco公司)；标准胎牛血清(杭州四季青生物科技有限公司)。

1.2 仪器 标准超净工作台(苏净集团安泰公司)；MCO-17AIC型CO2孵箱(日本三洋公司)；DT5-3型低速自动平衡离心机(北京医用离心机厂)；倒置显微镜(日本OLYMPUS公司)；Multiskan Ascent酶标仪(芬兰Labsystems公司)；BD FACSCanto II流式细胞仪(美国BD Biosciences)。

1.3 方法

1.3.1 U251细胞株传代培养条件 U251细胞贴壁生长在含有10%胎牛血清、青霉素100 U/mL、链霉素100 mg/L的RPMI 1640完全培养液中。在37 ℃，5%CO2细胞培养箱内传代培养，0.25%胰蛋白酶消化，每2～3天消化1次，取对数生长期细胞用于实验。

1.3.2 试剂的配制 将鹿茸多肽溶解在PBS配制成1.0 mg/mL浓度，过滤除菌后，分装后-20 ℃备用。……