酶联免疫吸附试验检测人叶酸受体抗体IgM方法的建立及评价

2014-08-09王琳琳叶荣伟任爱国

中国医学科学院学报 2014年4期

杨娜，王琳琳，袁悦，叶荣伟，任爱国

北京大学生育健康研究所卫生部生育健康重点实验室北京大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系，北京100191

尽管有研究显示围产期补充叶酸可以减少神经管畸形的发生率［1-2］，但大多数新生儿神经管畸形患儿的母亲在孕期并未出现血叶酸缺乏［3-4］。叶酸受体是介导叶酸进入细胞的重要转运体，在母体胎儿叶酸传递过程中发挥重要作用。2004年，Rothenberg等［5］报道人体内的叶酸受体自身抗体与神经管畸形有关。此后，多项研究显示叶酸受体抗体可能与唇腭裂、孤独症、脑叶酸缺乏综合征等相关［6-8］，尚需要大样本量流行病学研究证实这种相关性。在进行人群研究时，需要一种可靠、高通量的叶酸受体自身抗体检测方法。目前，叶酸受体抗体的检测方法有放射性同位素标记法和酶联免疫吸附试验 (enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)。放射性同位素标记法的操作复杂［5］，不适合大样本研究。目前，在ELISA检测叶酸受体自身抗体时，商品化的包被蛋白只有牛源叶酸结合蛋白，如何获得高纯度的人叶酸受体蛋白是关键。本课题组已经成功建立了从健康人胎盘中提取并纯化叶酸受体蛋白的方法［9］。本研究旨在建立ELISA检测血浆中叶酸受体自身抗体IgM的方法，并对该方法的灵敏度、精密度和稳定性进行评价。