肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化
2014-08-07莫翠菊秦雪康晓楠彭契六江凯2宇隋靖喆翟励敏刘银坤2
莫翠菊秦 雪康晓楠彭契六江 凯2,卢 宇隋靖喆翟励敏刘银坤2,李 山△
(1广西医科大学第一附属医院检验科 南宁 530021;2复旦大学附属中山医院肝癌研究所 上海 200032;3复旦大学生物医学研究院 上海 200032)
肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化
莫翠菊1,2▲秦 雪1▲康晓楠3彭契六1江 凯2,3卢 宇1隋靖喆1翟励敏1刘银坤2,3李 山1△
(1广西医科大学第一附属医院检验科 南宁 530021;2复旦大学附属中山医院肝癌研究所 上海 200032;3复旦大学生物医学研究院 上海 200032)
目的应用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面转移相关的特征性糖谱。方法应用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导建立肝癌上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)细胞模型。通过凝集素芯片比较诱导前后细胞膜的糖谱改变,采用凝集素印迹和荧光细胞凝集素免疫组化方法验证芯片结果。结果诱导后细胞对凝集素ACL、BPL、JAC、MPL、PHA-E、SBA和SNA的亲和作用减弱,而对凝集素 AAL、Con A、DBA、GSL Ⅱ、ECL、HAL、LCA、LTL、NML、NPL、PHA-L、PTL Ⅱ和 WFL的亲和作用增强。提示诱导后肝癌细胞表面出现了黏蛋白T/Tn抗原、平分型N-乙酰葡萄糖胺、α2,6唾液酸和末端α或β连接的N-乙酰半乳糖胺结构减少;而末端和核心岩藻糖、高甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺β1,6分支和复杂型寡糖分支结构增多。结论肝癌细胞发生EMT过程中细胞膜表面糖链结构改变,提示糖链结构与肝癌的转移密切相关,为有效控制肝癌转移、改善预后提供了新思路。
凝集素芯片; 糖谱; 肝癌(HCC); 上皮间质转化(EMT); 肝细胞生长因子(HGF)
蛋白质糖基化是翻译时一种重要的共修饰方式,蛋白质糖基化修饰伴随多种肿瘤的发生和侵袭转移,并会随着病情而改变[1]。……
