池翠杰， 王 伟， 季一兵

(中国药科大学理学院，江苏南京210009)

毛细管电色谱(CEC)具有毛细管电泳(CE)和高效液相色谱(HPLC)的双重分离性能［1］，被广泛用于手性药物、小分子物质、生物样品以及复杂混合物的分离分析［2-7］。毛细管整体柱具有制备方法简单、化学性质稳定、传质效率高、柱容量高等优点，被誉为第4代分离介质［8］。聚丙烯酸酯有机聚合物整体柱，因聚合单体选材范围广，可灵活在固定相中引入需要的活性基团，且使用的pH范围宽，在pH 2～12范围内能稳定存在，而成为目前研究最普遍的CEC 固定相基质之一［9］。

蛋白质类手性选择剂因独特的三维结构而对手性对映体有强大的拆分能力［10］。限于蛋白质作添加剂时背景吸收会干扰分析测定［11］，因此其作为固定相的应用得到迅速发展［12-14］。但是应用于整体柱CEC手性固定相中的报道目前仅限于牛血清白蛋白(BSA)和卵粘蛋白(OVM)［15，16］，且拆分的药物非常有限，只实现了色氨酸等氨基酸、华法林、安息香的分离，蛋白质亲和整体柱CEC手性拆分的优势没有得到充分发挥。因此探寻拆分能力更强的蛋白质手性选择剂，以CEC整体柱为基质制备手性固定相(CSP)是目前较有前景的研究方向。

胃蛋白酶是一种酸性蛋白质，相对分子质量为34 600，等电点约为1，由327个氨基酸组成。其作为手性选择剂适合拆分碱性和中性的手性对映体，具有广泛的应用范围，已成功应用于HPLC和CE对各类光学异构体的分离［17-19］。Fanali等［17］将胃蛋白酶作为手性添加剂应用于毛细管区带电泳(CZE)实现了普萘洛尔、异丙嗪、维拉帕米等的拆分。……