刘志国，谢旭东，徐德刚，刘洪波

（枣庄学院体育学院，山东枣庄277160）

花色苷（anthocyanin）作为一种天然色素，是花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，广泛存在于葡萄、山楂、蓝莓、桑葚等偏红色和紫色的植物组织中。现代研究发现，花色苷具有促进生长发育、提高运动能力、清除自由基、提高免疫力等多种生物活性功能。有关花色苷功能性的研究，包怡红等研究了提取条件对蓝靛果花色苷抗氧化活性的影响[1]，刘荣等研究了笃斯越橘花色苷抗氧化活性[2]，王忠合等研究了葡萄籽原花青素提取物的保健功能与应用[3]。目前对于花色苷对小鼠生长发育、运动能力和骨骼肌抗氧化酶系的综合研究还比较少。本研究以昆明小鼠为研究样本，分组进行花色苷给药，分析其体重变化、力竭游泳时间和小腿三头肌中SOD、GSH-Px和MDA的含量，以期为花色苷的保健功能提供动物实验依据。

1 实验材料与方法

1.1 材料

1.1.1 花色苷

市场购买花色苷含量较高的紫甘薯、蓝莓、桑葚，洗净后等质量经粉碎→浸提→去脂→萃取→减压蒸干→花色苷→低温冷藏。由枣庄学院运动生化实验室制取。

1.1.2 实验动物

昆明小鼠 65只，5周龄，体重（20±2）g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号：SCXK（京）2012-0003。

试剂：超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）试剂盒、丙二醛（MDA）试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组及处理

小鼠喂食啮齿类动物常规饲料，正常进食饮水，动物房温度（25±0.5）℃，相对湿度（70±1）%。适应性喂养5 d后，挑选出60只随机分为四组：对照组、低剂量花色苷组（低剂量组）、中剂量花色苷组（中剂量组）、高剂量花色苷组（高剂量组）。从第1周开始，各组小鼠每天9点，各在90 cm×80 cm×60 cm玻璃水槽中进行5 min无负重适应性游泳训练，往后每周增加2 min。每周第7天游泳前测量体重，然后低剂量花色苷组、中剂量花色苷组、高剂量花色苷组分别按照小鼠体重0.001、0.002、0.003 mg/g进行花色苷给药，花色苷溶解于0.5 mL纯净水中灌胃，对照组同时给予相同体积的纯净水灌胃，持续35 d[4]。

1.2.2 力竭游泳试验

实验第35 d称量体重后，把各组小鼠尾根部按照体重5%负荷铅皮，放入温度为（25±0.5）℃训练用水槽测量力竭游泳时间，当小鼠沉入水中5 s不能浮起且不能完成翻正反射时计时结束。

1.2.3 取样及生理指标的测定

四组小鼠分别于末次力竭游泳后乙醚麻醉，迅速解剖取出右小腿三头肌，4℃生理盐水洗净血液后用滤纸吸干水分称重，加入生理盐水匀浆成100 g/L液体，3 500 r/min离心10 min后取上清液4℃冷藏保存。SOD、GSH-Px和MDA的测定，均严格按照试剂说明书操作。

1.3 数据处理

2 结果与分析

2.1 体重的测量结果

由表1可知，到实验结束，低剂量组小鼠体重和对照组没有差别；中剂量组到第21 d和对照组有显著性差异，从第28 d到结束有非常显著性差异；高剂量组在第14 d和对照组有显著性差异，在第21 d到结束有非常显著性差异。

表1 实验中小鼠体重的变化Table 1 The change of experiment on the body weight of rats

2.2 小鼠力竭游泳时间

小鼠力竭游泳时间的比较见表2。

表2 小鼠游泳时间的比较Table 2 Comparing the swimming time of rats

由表2可知，各组游泳时间有较大差别，与对照组相比，低剂量组游泳时间增加了5 min，但没有显著性差异；中剂量组游泳时间增加了7 min且有显著性差异；高剂量组游泳时间增加了17 min且有非常显著性差异。

2.3 力竭游泳后骨骼肌抗氧化指标

各组小鼠游泳后骨骼肌SOD、GSH-Px和MDA的变化，见表3。

表3 各组小鼠游泳后骨骼肌SOD、GSH-Px和MDA的变化Table 3 The change on SOD，GSH-Px and MDA in skeletal muscle about rats after swimming

由表3可以看出，小鼠骨骼肌中SOD活性随着花色苷浓度的升高而增强，低剂量组和对照组有显著性差异，中剂量组和高剂量组活性与对照组均有非常显著性差异；GSH-Px活性在低剂量组虽有升高但没有显著性差异，中剂量组和高剂量组与对照组相比有非常显著性差异；MDA的含量随着花色苷浓度的升高而降低，低剂量组和中剂量组与对照组相比均有显著性差异，而高剂量组和对照组呈非常显著性差异。

3 结论与讨论

体重是描述小鼠横向发育的指标，能在一定程度上反映小鼠骨骼、肌肉、皮下脂肪及内脏器官综合发育状况。试验前各组小鼠体重无显著性差异，中剂量组从第21天、高剂量组从第14天开始体重和对照组相比有显著性差异。说明花色苷给药能较好地促进小鼠体内蛋白质合成代谢，增加体重，促进小鼠的生长发育[5-6]。

作为体内清除氧自由基的首要物质，骨骼肌中SOD活性的高低和抗氧化水平成正比，和SOD一样，GSH-Px也是一种重要的过氧化氢催化酶，都可以有效地保护细胞膜结构和功能的完整性。平常状态下，机体内的自由基浓度在SOD和GSH-Px作用下保持一种稳定的平衡，当力竭运动时，体内生化反应加速，就会产生大量自由基，引发SOD和GSH-Px活性降低。进行花色苷给药的小鼠SOD和GSH-Px活性显著提高，可能是花色苷在参与体内生化反应的过程中，抑制和降低了自由基的产生，相应参与对抗自由基的SOD和GSH-Px减少，所以骨骼肌内SOD和GSH-Px活性增强，又可以进一步消除自由基，形成一个良性循环[7-9]。MDA是脂质过氧化反应的代表产物，能反映机体产生自由基的水平和细胞受损程度。运动能力的动物实验一般采用跑台实验或游泳实验，常采用力竭方式。力竭游泳时间的长短能反映小鼠运动能力的大小，实验分析发现，随着花色苷浓度的上升，MDA含量呈反比下降，表明花色苷具有明显的抗自由基抗氧化的功能，能够降低骨骼肌细胞的损伤程度，有效保证了骨骼肌的运动机能，增强运动能力[10-11]。

综上所述，通过实验证明，花色苷能够促进小鼠的生长发育、增强运动能力、提高骨骼肌抗氧化水平，为研究花色苷的保健作用和开发运动员专用食品提供参考。

[1]包怡红,李文星,齐君君,等.提取条件对蓝靛果花色苷抗氧化活性的影响[J].食品科学,2010(22):20－24

[2]刘荣,冷梅.笃斯越橘花色苷抗氧化活性研究[J].食品工业科技,2012(15):96-99

[3]王忠合,朱俊晨,陈惠音.葡萄籽原花青素提取物的保健功能与应用[J].食品科技,2006(4):135-138

[4]任昭君,刘洪珍,郭成吉.“复方抗氧化制剂”对大鼠运动能力和骨骼肌自由基代谢影响的研究[J].中国体育科技,2005(41):17－19

[5]熊正英,刘社琴.蒺藜提取物对训练大鼠糖原、血睾酮和运动能力的影响[J].体育科学,2004(8):35-37

[6]卢健,陈彩珍,许永刚,等.补充抗氧化剂对老年运动小鼠骨骼肌抗氧化水平的影响[J].体育学刊,2003(4):57-59

[7]赵斌,姚鸿恩.体育保健学[M].北京:高等教育出版社,2011:275-312

[8]姚绩伟,杨永亮,唐晖,等.罗汉果提取液对训练小鼠运动能力及心肌自由基代谢的影响[J].北京体育大学学报,2009(3):67-69

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