IAC-HPLC法检测牛奶中黄曲霉毒素和玉米赤霉醇及类似物质量分数
2014-07-13王昕姚佳果旗里南江帆王雄张建新
王昕,姚佳,果旗,里南,江帆,王雄,张建新
(1.西北农林科技大学食品科学与工程学院,陕西 杨凌 712100;2.北京中检维康技术有限公司,北京 100044)
0 引 言
黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2, 加上2种代谢物M1、M2可以直接污染食品和饲料,对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡[1]。
玉米赤霉醇是玉米赤霉菌在生长过程中的次生代谢产物[2]。α-玉米赤霉醇及类似物都属于雷索算内酯类药物[3]。玉米赤霉醇曾作为反刍动物家畜牛羊的生长促进剂,但后来研究表明,其在动物组织中的残留会影响人体健康,甚至在外部条件诱导下,具有致癌作用[4-5]。
目前针对这两大类物质的检测方法主要有HPLC(高效液相色谱法)、TLC (薄层层析法)、LC-MS/MS(液质联用)及ELISA(酶联免疫)法[6-9]。 其中ELISA法使用较为普遍,但该方法定量误差较大,仅可作为阳性样品的初筛工具[10],目前针对这两大类物质多采用单独分析方法来定量[11-14]。
1 实 验
1.1 试剂
甲醇(色谱纯),乙腈(色谱纯),去离子水,黄曲霉毒素(标准品),玉米赤霉醇类(标准品);黄曲霉毒素玉米赤霉醇复合免疫亲和柱(AZ复合免疫亲和柱)。
1.2 仪器
L-2485型高效液相色谱仪带荧光检测器,SPD-10A型高效液相色谱仪带紫外检测器,光化学衍生器,800D型离心机,泵流操作架,DCY-12S型氮吹仪,微型涡旋混合器。
1.3 方法
1.3.1 去脂
量取牛奶样品60 mL,将样液移入2个50 mL离心管中以4 000 r/min离心15 min,去除上层脂肪备用。
1.3.2 富集和净化
将免疫亲和柱置于泵流操作架上,取50.0 mL去脂奶以1滴/s的流速全部通过AZ复合亲和柱,待溶液全部流出后,用10.0 mL纯水以1~2滴/s的流速淋……
