王佳，陈格飞，孟清

东华大学生物科学与技术研究所，上海 201620

盐离子对次壶腹腺丝蛋白重组模块的影响

王佳，陈格飞，孟清

东华大学生物科学与技术研究所，上海 201620

为研究不同生理环境对蛛丝蛋白组装及成丝的影响，首次以MiSp序列为对象，研究其NTR1SR2CT重组模块在不同种类 (浓度) 盐离子条件下的聚集和成纤维特性及其在成纤维过程中二级结构的变化。基于大腹园蛛MiSp全长序列构建NTR1SR2CT模块，并在大肠杆菌Escherichia coli BL21中成功表达。借助8 mol/L尿素裂解包涵体进行变性纯化得到NTR1SR2CT重组蛋白。NTR1SR2CT重组蛋白二级结构主要为无规则卷曲(Random coil) 或α螺旋 (Helix)，在自然成丝及冻干过程中部分random coil或helix转变为β折叠 (β-sheet)，甲醇能促进该转变过程。另外，钾离子和磷酸根离子有利于NTR1SR2CT重组蛋白聚集从而促进丝纤维的形成。研究结果为成丝机理研究奠定了基础，同时也为工业化生产高品质的蛛丝纤维提供了条件。

次壶腹腺丝蛋白，组装，盐离子，二级结构，丝纤维

蜘蛛丝是一种天然高分子量蛋白质纤维，具有良好的机械学性能和生物学品质，如强度高、弹性好、质地轻、耐高低温及生物相容性好等，在生物医学、材料、建筑和军事等领域具有很大的潜在应用价值[1-4]。近期蛛丝蛋白已成功应用于人造皮肤和肿瘤细胞治疗药物传送等生物医学领域，但是由于蛛丝蛋白的组装及成丝机制尚不明确等，限制了蛛丝蛋白的后续应用[5-7]。

主壶腹腺丝由主壶腹腺分泌，具有高强度和良好的延展性，主要用于逃逸和编织网框[8]。……