基于重组溶葡球菌酶和ATP生物发光技术特异定量检测金黄色葡萄球菌
2014-06-24李玉元米志强安小平周育森童贻刚
生物工程学报 2014年8期
李玉元,米志强,安小平,周育森,童贻刚
1 广西医科大学,广西 南宁 530021
2 军事医学科学院微生物流行病研究所 病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071
基于重组溶葡球菌酶和ATP生物发光技术特异定量检测金黄色葡萄球菌
李玉元1,2,米志强2,安小平2,周育森1,2,童贻刚2
1 广西医科大学,广西 南宁 530021
2 军事医学科学院微生物流行病研究所 病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071
基于重组溶葡球菌酶和ATP生物发光法建立特异定量检测金黄色葡萄球菌的方法。优化设计合成溶葡球菌酶序列,构建重组表达载体pQE30-Lys,转化至大肠杆菌M15并诱导表达,镍柱纯化得到目的蛋白。利用重组溶葡球菌酶和ATP生物发光法特异定量检测金黄色葡萄球菌并与平板计数对比。成功表达了重组溶葡球菌酶,并建立了特异定量检测金黄色葡萄球菌的方法,与平板计数具有显著线性关系。本研究建立的将重组溶葡球菌酶和ATP生物发光法相结合的检测方法操作快捷简单,具有良好的应用前景。
金黄色葡萄球菌,重组溶葡球菌酶,ATP生物发光,特异和定量检测
金黄色葡萄球菌 (简称金葡菌) 是人类皮肤表面常见菌群,但它同时也是一种非常重要的致病菌,能够引起小到皮肤病大到肺炎及菌血症这类威胁人类生命的疾病[1-5]。不仅仅是人类,家畜也容易感染金黄色葡萄球菌,金葡菌能够导致奶牛乳腺炎及鸡传染性关节炎,这严重威胁了食品健康,导致食品污染,带来重大经济损失[6-7]。……
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