张 璐，孔祥虹，何 强，李建华，邹 阳，李 莹

（陕西出入境检验检疫局，陕西 西安 710068）

4-甲基咪唑（4-(5-)-methylimidazole，4-Mel）和2-甲基咪唑（2-methylimidazole，2-Mel）是一类有机杂环化合物[1]。两种物质互为同分异构体。其中4-Mel具有强烈的惊厥作用，能使动物（如兔、鼠、小鸡等）产生超兴奋状态[2]。由于4-Mel具有抑制肝脏中血红色素P450同功酶的作用，因此可能会导致肌肉无力从而引起痉挛[3]。4-Mel和2-Mel以亚硫酸铵为原料生产的焦糖色素副产物存在于食品中[4]。根据WHO规定，以色率2 000 EBC单位计，焦糖色素中4-Mel含量不得大于200 mg/kg[2]。美国国家毒理学规划处（National Toxicology Program，NTP）组织和美国加州OEHHA（Office of Environmental Health Hazard Assessment）组织共同将4-Mel作为可致癌物质发出警告[5-6]。欧盟食品安全委员会建议以亚硫酸铵为原料生产的焦糖色素中4-Mel每日最大摄取量不超过200 mg/（kg·d）[7]。

目前检测4-Mel和2-Mel的方法主要集中为高效液相色谱（high perfornance liquid chromatography，HPLC）法[8-12]、气相色谱（gas chromatography）法[13-15]、高效液相色谱-质谱（liquid chromatography-mass spectrometry，LCMS）法[4,16-17]、气相色谱-质谱（gas chromatographymass spectrometry，GC-MS）法[17-21]、二维色谱（two dimensional chromatography）法[22-23]、高效液相色谱-串联质谱（highy performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，HPLC-MS-MS）法[24-25]。高效液相色谱法需要采用双（2-乙基己基）磷酸盐提取后，庚烷磺酸钠为离子对试剂为流动相进行检测，前处理较为复杂。GC-MS法需要进行衍生化，操作较为繁琐，检测方法灵敏度不能满足测定要求。二维液相色谱普及率较低。超高效液相色谱-串联质谱（ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，UPLC-MSMS）法前处理不需要衍生，操作简便，选择性灵敏度明显优于其他检测方法。

本研究应用固相萃取（solid phase extraction，SPE）技术结合UPLC-MS-MS法，建立了饮料中4-Mel和2-Mel的检测方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

所有饮料均为市购。

4-Mel和2-Mel标准品（纯度＞98.5%） 德国Dr.Ehrenstorfer GmbH公司；4-甲基咪唑-d6（4-Mel-d6）（纯度＞99.0%） 加拿大CDN公司；甲醇、乙腈（均为色谱纯） 德国Merck KgaA公司；……