限制性内切酶酶切确证河豚鱼成分PCR检测结果
2014-06-21曲良苗陈文炳缪婷玉邵碧英江树勋
曲良苗,陈文炳*,缪婷玉,邵碧英,彭 娟,江树勋
(1.福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心,福建 福州 350001;2.福建农林大学食品科学学院,福建 福州 350003);3.福建省检验检疫技术研究重点实验室,福建 福州 350001)
自1980年代聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术发明以来,已被广泛应用于食品中的动植物成分鉴别[1-8],在鱼制品鱼类成分的鉴别中的应用也越来越多[9-11],DNA分子标记技术在河豚鱼种类鉴别及遗传分析方面也有不少报道[12-22]。但普通PCR方法存在扩增结果出现假阳性的可能,如果PCR扩增所使用的引物序列与非目的物种的某段DNA的序列有部分互补性,就会扩增出与目的物种大小相似的PCR产物,仅靠凝胶电泳图谱判断,可能因假阳性结果而产生误判[23],因此有必要采取确证措施加以排除。目前常用的PCR检测结果的确证方法主要有DNA限制性内切酶技术与DNA测序方法[24-25]。
我国海域广阔,河豚鱼种类繁多,鱼类加工食品中因混有河豚鱼,使得消费者误食而中毒的事件时有发生,2007年发生了由于出口美国的鮟鱇鱼混有河豚鱼,导致顾客误食而中毒的事件,这些事件对我国食品出口贸易造成负面影响。同年日本食品检验部门在我国南方某食品有限公司出口的马面鲀鱼干中检出河豚鱼成分。为了保证消费者的健康与权益,保障水产加工制品的质量与安全,急需一种能够在食品中快速检测出河豚鱼成分的方法。本研究基于作者于2011年建立的河豚鱼成分检测PCR方法[22]检测河豚鱼与其他样品,发现在金枪鱼与鲈鱼中也能扩增出与河豚鱼DNA片段大小(423 bp)接近的PCR产物,产生了假阳性结果。……
