潘月华，李从荣

(武汉大学人民医院检验科，湖北武汉430060)

·论著·

4 308份血培养标本的致病菌菌种分布及其耐药性分析

潘月华，李从荣

(武汉大学人民医院检验科，湖北武汉430060)

目的 了解临床血培养致病菌的菌种分布及其耐药情况，为临床合理应用抗菌药物提供科学的依据。方法血液培养标本用全自动血液培养仪BACTEC-FX BD进行培养，阳性标本用全自动微生物鉴定/药敏仪Phoenix-100 BD进行鉴定，并对标本中分离出来的病原菌的分布及耐药情况进行回顾性分析。结果在4 308份血液标本中分离出病原菌385株，阳性检出率为8.9%。其中革兰氏阳性菌218株，占56.6%；革兰氏阴性菌140株，占36.4%；真菌27株，占7.0%。分离率占前6位者为大肠埃希氏菌72株，占18.7%、表皮葡萄球菌44株，占11.4%、真菌27株，占7.0%、金黄色葡萄菌26株，占6.8%、肺炎克雷伯菌24株，占6.2%、腐生葡萄球菌20株，占5.2%。大肠埃希氏菌的耐药率以亚胺培南、美罗培南最低（0），表皮葡萄球菌的耐药率以利奈唑胺、呋喃妥因最低(0)，金黄色葡萄的耐药率以呋喃妥因、利奈唑胺最低(0)。结论血液培养主要病原菌为革兰氏阳性球菌，各种条件致病菌呈上升趋势，多数病原菌为多重耐药且比较严重，临床应针对性抗菌治疗，并积极预防和控制院内交叉感染，加强血培养标本采集的规范。

血液培养；病原体；抗药性；抗菌药物；合理用药

血液感染是严重的全身性感染，进展迅速，病死率高。血液培养是临床诊断败血症的重要依据，明确其病原菌以及耐药性趋势，对于临床的用药至关重要。为了解近年来患者血液培养中病原菌的分布及耐药情况，笔者回顾性的分析了本院4 308份血液培养标本检出的病原体及其药敏结果，以研究血流感染的流行状况与耐药趋势，为临床合理用药提供参考依据。现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 标本来源2013年3月6日至8月6日期间我院病房送检的血液培养标本4 308份。

1.2 标本采集与培养根据美国临床和实验室标准协会(CLSI)制定的微生物临床检验标准及操作规程进行标本采集，将采集到的成人或者儿童标本，分别接种于BD公司生产的成人或者儿童血培养瓶，尽快置于BACTEC-FX BD全自动血培养仪。仪器报告阳性后，立即接种于血平板和巧克力平板，置35℃5%CO2培养箱培养18～24 h，挑取菌落经Phoenix-100 BD微生物鉴定仪鉴定。

1.3 质控菌株大肠埃希氏菌(ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、铜绿假单胞菌(ATCC29212)均由湖北省临床检验中心提供。

1.4 统计学方法采用SPSS19.0软件进行数据处理。各组间阳性率比较采用行×列的χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病原菌株分布4 308份血液标本中分离出病原菌385株。革兰氏阳性菌218株，占56.6%；革兰氏阴性菌140株，占36.4%；真菌27株，占7.0%。分离率占前6位者为大肠埃希氏菌(72株，占18.7%)、表皮葡萄球菌(44株，占11.4%)、金黄色葡萄菌(26株，占6.8%)、肺炎克雷伯菌(24株，占6.2%)、腐生葡萄球菌(20株，占5.2%)、人葡萄球菌(12株，占3.1%)。革兰氏阴性杆菌以大肠埃希氏菌检出率最高，其次为肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌，分别占18.7%、6.2%、2.6%；革兰氏阳性球菌以表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌检出率最高，分别占11.4%、6.8%和5.2%，见表1。

2.2 常见革兰氏阴性杆菌对19种抗生素的耐药情况革兰氏阴性杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药性较低，但鲍曼不动杆菌的耐药性较高，同时表现出多重耐药的特点，应引起临床的重视。革兰氏阴性杆菌对头孢菌素类药物出现了不同的耐药性，有的甚至达到100%，说明其治疗效果偏差。大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌对阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南、美洛培南、阿米卡星的耐药性较低(＜8.3%)，对氨苄西林的耐药率分别达93.1%、87.5%。大肠埃希氏菌的耐药率以亚胺培南、美罗培南最低(0)，见表2。

表1385 株检出病原菌菌种分布

表2 常见革兰氏阴性杆菌对19种抗生素的耐药情况[株（%）]

2.3 常见氏革兰阳性球菌对22种抗生素的耐药情况革兰氏阳性球菌主要的病原菌对青霉素类、头孢西丁的耐药性很高，有的高达100%，失去治疗作用，应采用其他药物治疗。革兰氏阳性球菌主要的病原菌对呋喃妥因、利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁的耐药性较低，有较好的治疗效果。表皮葡萄球菌的耐药率以利奈唑胺、呋喃妥因最低(0)，金黄色葡萄的耐药率以呋喃妥因、利奈唑胺最低(0)，见表3。

表3 常见革兰阳性球菌对22种抗生素的耐药情况[株（%）]

3 讨论

通过对我院住院患者送检的血液培养标本研究显示，4 308份血液标本中共分离出病原菌385株，阳性检出率为8.9%，略低于国内多家医院的报道[1]。其中革兰氏阳性菌218株，占56.6%；革兰氏阴性菌140株，占36.4%；真菌27株，占7.0%。由此表明，革兰氏阳性球菌分离率高于革兰氏阴性杆菌，引起血液感染的病原菌主要是葡萄球菌属和肠杆菌科，与国内外资料报道相似[2-3]。儿童检出病原菌共23株，检出的病原菌主要为表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌，与国内的文献报道类似[4-5]。体外药敏结果显示，儿科血液病房患儿血培养主要病原菌对常用抗菌药物耐药率高，凝固酶阴性葡萄球菌耐药率高，对甲氧西林、青霉素、红霉素的耐药率均大于85.0%，应加强监控。由于儿童检出病原菌标本量小，若需获得更有价值的病原菌检出和耐药性的信息，需有更多的样本以及连续监测。

ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，以大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌为代表。近年来，由于ESBLs类抗生素的大量应用，从而产生了由质粒介导的ESBLs。通过转化、转导等形式使耐药基因在细菌之间传播与扩散，从而引起细菌产生多重耐药。ESBLs(+)，临床上可能对所有青霉素类、头孢菌素类以及氨曲南治疗无效，即使体外对部分药敏感，应改用其他药物[6]。

革兰氏阳性菌中凝固阴性葡萄球菌的检出率较高，而其为皮肤常居菌群，因此检出凝固阴性葡萄球菌应结合患者临床症状和检出时间等因素分析其为污染菌或感染病原菌[7-9]。病原菌的检出时间较污染菌早，通常在48 h内显示阳性。若同一患者不同部位的两次血培养均检出同一种菌，则应考虑为病原菌。为了准确诊断血流感染，在采集血液标本时应严格遵循血培养采集方法，减少污染，同一患者应至少送检两份血标本。

真菌是院内感染的常见病菌之一。在分离菌株中，真菌占7.0%，高于徐小仁等[10]的报道。近年来，由于抗菌药物的不合理使用，加之糖皮质激素和免疫抑制剂的应用，使院内病原菌感染发生率明显增加；一些患者使用引流管、深静脉留置管或气管插管等，也是致使条件致病菌成为病原菌呈上升趋势的原因，临床上应重视这两个方面，预防病原菌感染。

由本文的统计结果显示，血液培养的主要病原菌为革兰氏阳性球菌，各种条件致病菌成为病原菌呈上升趋势，且多数病原菌为多重耐药，临床上应根据本院的具体情况，结合药敏结果，实行个体化用药。及时监测病原体流行状况及其耐药情况，仍然是目前临床有效、合理抗血流感染治疗的主要手段。

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Distribution of pathogens detected from 4 308 blood culture samples and analysis of drug resistance.

PAN Yue-hua,LI Cong-rong.Department of Laboratory Science,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060, Hubei,CHINA

ObjectiveTo study the distribution of common pathogens and drug resistance to common antibiotics in patients with septicemia,and to provide scientific basis for clinically targeted antimicrobial therapy.MethodsBy using BACTEC-FX BD automatic blood culture system for culturing blood samples,the pathogens identification and resistance test were carried out by automatic microorganism identification instrument(Phoenix-100 BD),and the distribution and drug resistance of pathogens were studied and analyzed.ResultsTotally 385 strains of pathogens were isolated from 4 308 blood culture samples,with the positive rate of 8.9%,among which 218(56.6%)were Gram-positive bacteria,140(36.4%)were Gram-negative bacteria,and 27(7.0%)were fungi.The top six pathogens with isolation rate higher than others were Escherichia coli(72 strains,18.7%),Staphylococcus epidermidis(44 strains,11.4%), Fungi(27 strains,7.0%),Staphylococcus auresu(26 strains,6.8%),Klebsiella pseudomonas(24 strains,6.2%),Staphylococcus saprophyticus(20 strains,5.2%).Escherichia coli was found lowest resistant to Imipenem and Meropenem, while Staphylococcus epidermidis and Staphylococcus auresu was lowest resistant to Linezolid and Nitrofurantoin.ConclusionThe main pathogens of septicemia are Gram-positive bacteria,with various conditional pathogenic bacteria on the rise.The majority of pathogens are multi-drug resistant to antibiotics.Clinical physicians should have persistence to actively prevent and control nosocomial cross-infections.

Blood culture;Pathogens;Drug resistance;Antimicrobial agents;Rational use of drug

R446.11

A

1003—6350（2014）21—3180—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.21.1247

2014-03-10)

李从荣。E-mail：1225870670@qq.com