慢性宫颈炎患者自然杀伤T T细胞与炎症分度的关系

2014-06-09麦艳芬吴叶欢周瑞芳麦雪鹂游玉卿

分子影像学杂志 2014年3期

关键词：康栓分度宫颈炎

麦艳芬，吴叶欢，周瑞芳，麦雪鹂，游玉卿

临床研究

慢性宫颈炎患者自然杀伤T T细胞与炎症分度的关系

麦艳芬1，吴叶欢2，周瑞芳1，麦雪鹂1，游玉卿1

1佛山市第五人民医院妇科，广东佛山528211；2佛山市南海区妇幼保健院妇科，广东佛山528200

目的研究自然杀伤T细胞（NKTs）在慢性宫颈炎（CCV）发病及治疗转归的作用及其与炎症分度的关系。方法入选70例CCV患者，采用流式细胞术检测其外周血NKTs及其细胞因子γ干扰素（IFN-γ）及白介素10（IL-10）含量。将CCV患者随机分为观察组及对照组，后者给予常规治疗，观察组在对照组基础上加用保妇康栓治疗，比较治疗前后NKTs及其细胞因子变化，并分析其与炎症分度的相关性。结果与对照组比较，慢性宫颈炎患者NKTs及IFN-γ均显著降低（P=0.016、0.019），而IL-6显著高于对照组（P=0.001）。治疗后两组患者NKTs及IFN-γ较治疗前明显回升，而IL-6均较治疗前明显下降，两组治疗前后差异均有显著性（P＜0.05）。治疗后观察组NKTs及IFN-γ显著高于对照组，而IL-6显著低于对照组（P＜0.05）。相关性分析显示NKTs及IFN-γ与炎症分度呈负相关性，而IL-6与炎症分度呈正相关性相关性（P＜0.05）。结论NKTs及IFN-γ降低，而IL-10升高是CCV患者的一个重要免疫学特征，三者与炎症分级呈明显相关性，且可反映治疗效果，因而具有重要临床意义。

慢性宫颈炎；自然杀伤细胞；细胞因子；炎症分度；相关性分析

作为最常见的妇科炎症，慢性宫颈炎(CCV)包括宫颈阴道部炎症及宫颈管黏膜炎症，前者可有阴道炎症引起，而后者是临床最为常见的宫颈炎类型［1］。近年国内外宫颈炎发病率有增加趋势，且由于宫颈管黏膜上皮为单层柱状上皮，易演变为宫颈癌，因此CCV的治疗尤为重要［2］。已有报道自然杀伤细胞（natural killer cell, NKC）与宫颈病变密切相关，且宫颈炎患者存在T细胞亚群的失调［3］。作为具有NKC及T细胞双重功能的特殊T细胞［4］，自然杀伤T细胞（natural killer T cells, NKTs）是否也参与CCV的发病机制，与炎症程度关系如何等，目前均未见相关报道。本文以上述背景为基础探讨NKTs与CCV炎症分度及治疗的关系，如下。

1 资料与方法

1.1 患者一般资料

以本院2012年1月~2014年1月期间收治的CCV患者作为研究对象，均行宫颈刮片或宫颈管吸片或病理学检查确诊。合并肿瘤、风湿免疫性疾病、服用免疫抑制剂者除外［5］。共入选70例，年龄21~68岁，平均44.26±23.19岁；其中宫颈Ⅰ度糜烂19例，Ⅱ度27例，Ⅲ度24例。入选同期到院查体的70例健康女性作为对照组，年龄19~67岁，平均43.18±24.03岁。两组的年龄无统计学差异。

1.2 流式细胞术检测

采集静脉血约3 ml，运用免疫磁珠法分选外周血单个核细胞；以CD3、CD56分离出NKTs，使用膜穿透剂对NKTs胞内细胞因子IFN-γ及IL-6进行染色，随后使用B＆D公司生产的多色流式细胞仪（型号FACSCalibur），检测NKTs、IFN-γ及IL-6的水平，采用百分含量表示［6］。

1.3 治疗方法

将以上70例CCV患者分为观察组及对照组各35例，两组的年龄、炎症分度均无统计学差异。其中观察组有13例及对照组有14例人乳头瘤病毒(HPV)阳性，均给予重组人干扰素α-2a凝胶治疗[7]。根据炎症分度，对照组患者：I及Ⅱ度者采用红核妇洁洗液10 ml药液冲洗外阴和阴道，2次/d，连用7 d；同时口服中成药。Ⅲ度患者给予微波治疗治疗［8］。观察组患者在对照组的基础上，加用保妇康栓治疗（将栓剂塞入阴道深部，每晚1粒，疗程7 d）［9］。治疗2周后复查NKTs、IFN-γ及IL-6含量。

1.4 统计学处理

定量资料采用均数±标准差表示，采用t检验比较两组间的差异，运用配对t检验比较治疗前后的NKTs、IFN-γ及IL-6变化；NKTs、IFN-γ及IL-6与分度的关系采用Pearson法。使用统计软件包SPSS 17.0分析数据，当P＜0.05认为是差异有统计学意义。

2 结果

2.1 NKTs与细胞因子含量

与对照组比较，慢性宫颈炎患者NKTs及IFN-γ均显著降低（P=0.016、0.019），而IL-6显著高于对照组（P= 0.001，表1）。

2.2 治疗后宫颈炎患者NKTs及细胞因子变化

治疗前观察组及对照组的NKTs、IFN-γ及IL-6均无统计学差异。治疗后观察组及对照组患者NKTs及IFN-γ较治疗前明显回升，而IL-6均较治疗前明显下降，两组治疗前后差异均有显著性（*P＜0.05）。治疗后观察组NKTs及IFN-γ显著高于对照组，而IL-6显著低于对照组（#P＜0.05）。

表1 两组NKTS及其细胞因子含量比较(n=70,％)

表2 宫颈炎患者治疗前后NKTs及其细胞因子含量比较(n=35,％)

2.3 相关性分析

相关性分析显示，NKTS及IFN-γ与炎症分度呈负相关性，而IL-6与炎症分度呈正相关性相关性(P＜0.05，表3)。

表3 NKTS及其细胞因子与宫颈炎分度的r及P值表

3 讨论

近年国内外发现宫颈病变与免疫异常密切相关，因此探索宫颈炎与免疫细胞的关系，具有重要性及创新性。作为同时具备NKC及T细胞功能的NKT，可表达多种细胞因子从而发挥不同的免疫功能，其中IFN-γ及IL-6是NKTs分泌的重要炎性细胞因子［10］。作为Th1类细胞因子，IFN-γ可诱导细胞免疫，并发挥抗病毒作用；IL-6属于Th2类细胞因子，是最为重要的促炎因子之一，可诱导体液免疫。目前有研究发现NKTs参与子宫内膜异位症（EMT）的发病机制，且与EMT的分期呈明显相关性［11］。然而，NKTs与CCV的关系如何？目前尚未见类似报道。尽管缺少直接相关的报道，但以下研究为搭建NKTs与CCV的关系提供了基础：如黄瑞等［12］发现宫颈癌患者外周血NK细胞活性降低，其活化性受体NKG2D表达的下降是NK细胞活性下降的原因之一；黄宇琨等［13］发现宫颈癌患者NKC、TNF-α及INF-γ表达均明显较少。宫颈癌化疗患者NKC明显降低，心理护理能使得T淋巴细胞亚群和NK细胞增多从而提高宫颈癌化疗患者免疫力。为此，笔者推测NKTs可能参与CCV的发病机制［14-17］。

本研究发现，与对照组比较，慢性宫颈炎患者NKTs及IFN-γ均显著降低，而IL-6显著高于对照组，说明NKTs、IFN-γ及IL-6与健康人存在差异性表达，但凭此一点还不足以认定NKTs及其细胞因子参与CCV的发病，因此笔者进行了干预试验：治疗前观察组及对照组的NKTs、IFN-γ及IL-6均无统计学差异，说明两组具有均匀性及可比性；治疗后观察组及对照组患者NKTs 及IFN-γ较治疗前明显回升，而IL-6均较治疗前明显下降，且治疗后观察组NKTs及IFN-γ显著高于对照组，而IL-6显著低于对照组；相关性分析显示，NKTs及IFN-γ与炎症分度呈负相关性，而IL-6与炎症分度呈正相关性相关性，亦即炎症越重，NKTs及IFN-γ含量越低，而IL-6含量越高。上述结果充分印证了NKTs、IFN-γ及IL-6参与CCV的免疫学机制，其过程可能是NKTs分泌减少导致宫颈局部抗炎不足而增加CCV患者的宫颈糜烂程度；相反，未能控制的炎症加重了NKTs及其所分泌的具有抗炎作用的IFN-γ的消耗，导致其含量降低；而炎症物质的趋化及炎症放大效应导致了IL-6的增加。

从治疗反应看，加用保妇康栓的观察组患者优于对照组，能更好的增加NKTs的活性，使IFN-γ分泌量增加，说明NKTs及IFN-γ是CCV患者的一个保护性因素；而治疗后IL-6下降，进一步说明IL-6是CCV患者的一个负面因素。因此，笔者认为三者可反应CCV的疗效。通过本研究笔者认为，NKTs及IFN-γ降低，而IL-10升高是CCV患者的一个重要免疫学特征，提示三者参与CCV的免疫学发病机制；三者与炎症分级呈明显相关性，且可反映治疗效果，因而具有重要临床意义。

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