稳定表达犬瘟热病毒细胞受体SLAM的BHK-21/SLAM细胞系的建立

2014-05-21刘文鑫赵姝静李丹丹冯瑜菲关玮琨何丽丽江馗语师东方

中国预防兽医学报 2014年6期

关键词：检测

朱颖，刘文鑫，赵姝静，李丹丹，冯瑜菲，关玮琨，何丽丽，江馗语，师东方*

(1.东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨 150030；2.沈阳市动物疫病防控中心，辽宁沈阳 110161)

犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)是单股不分节的负链RNA病毒，属于副粘病毒科(Paramyxoviridae)，麻疹病毒属(Morbillivirus)[1]，可引起食肉目动物发病和死亡，对养犬业、毛皮动物养殖业以及野生动物保护事业造成严重危害。

CDV可通过多种细胞表面受体感染细胞，如脊髓灰质炎病毒受体-4(Nectin-4)[2]及信号淋巴细胞激活因子(SLAM)[3]等。Vero和MDCK细胞为体外分离培养CDV的常用细胞系[4]，但这两种细胞均不表达CDV的重要受体犬SLAM，研究显示CDV在这两种细胞系上存在不易适应，不产生典型细胞病变(CPE)及毒力丢失等问题，给CDV的分离培养和生物学特性研究带来不便。有学者利用脂质体转染方法构建稳定表达SLAM的细胞系，如VERO-DST细胞系、MDCK-SLAM细胞系等[5]，重组细胞系对CDV的敏感性较转染前均有不同程度的提高。但这些表达SLAM的细胞系并未商品化，如果能够构建和筛选出具有相同特性的细胞系，可以为CDV研究提供更多的候选细胞。

CDV病毒能在BHK-21细胞上增殖培养，但CPE不明显。仓鼠作为CDV的感染动物模型及仓鼠细胞系BHK-21和HmLu用于培养增殖13株Aisa 1型和Aisa 2型的CDV的报道显示，仓鼠细胞系具有增殖培养CDV的潜在应用价值[6-8]。本研究将SLAM编码基因转染入BHK-21细胞，构建稳定表达SLAM的重组细胞系，为CDV的分离、生物学特性研究和疫苗毒生产提供一种新的有效细胞系。