孙 晶，周艳君，姜一峰，徐彦召，童 武，童光志

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒基因缺失标记疫苗ELISA鉴别诊断方法的建立

孙 晶，周艳君，姜一峰，徐彦召，童 武，童光志

（中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

为了配合（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）基因标记疫苗株（rHN4-Δ25+NP49株）的临床抗体鉴别诊断应用，本研究以标记疫苗中缺失的25个氨基酸多肽作为包被抗原，通过对ELISA反应条件的优化，确定抗原最适包被浓度为500 ng/孔，血清最佳稀释度为1:40，同时确定其阴阳性临界值S/P判定标准为0.15，批内和批间重复实验结果显示其变异系数均低于10%，表明该方法具有良好的重复性。对临床血清检测结果显示与IDEXX试剂盒检测结果的符合率为94.84%，采用25 aa负标记ELISA方法检测HuN4-F112免疫猪血清，结果显示从免疫后21 d可检测25 aa特异性抗体，该抗体至少可持续存在126 d。本研究建立的ELISA检测方法为今后PRRSV基因工程标记弱毒疫苗株在临床鉴别诊断的应用提供了有利保障。

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒；多肽抗原；25aa-ELISA

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的全球范围内严重危害养猪业的传染病[1]。1987年首先在美国发现该病，以各年龄段母猪繁殖障碍和呼吸疾病为特征的传染性疾病在美国和加拿大地区发现，并迅速向世界各地蔓延[2]；1996年我国学者郭宝清等[3]首次分离出猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV），2006年高致病性猪繁殖与呼吸综合征（highly pathogenic Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, HP-PRRS）的爆发[4,5]，给我国养猪业带来巨大损失，PRRS的监测和防控成为重要课题。……