乔长涛，谭 磊，于圣青，仇旭升，宋翠萍，孙英杰，胡桂学，丁 铲

（1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118；2.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

新城疫病毒NP蛋白MHC I类分子限制性T细胞表位研究

乔长涛1,2，谭 磊2，于圣青2，仇旭升2，宋翠萍2，孙英杰2，胡桂学1，丁 铲2

（1.吉林农业大学动物科学技术学院，长春 130118；2.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

为了对新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）的细胞毒性T细胞（cytotoxic T cell，CTL）表位进行研究，本研究通过在线分析软件预测了NDV弱毒株La Sota和强毒株Herts/33 NP蛋白的MHC I类分子限制性表位，共获得9条可能的表位多肽序列，并人工合成了这些短肽。分别构建了含有La Sota和Herts/33 NP基因的DNA重组质粒并免疫4周龄SPF级C57BL/6小鼠，首免后21 d加强免疫1次，二免后10 d无菌采集脾脏制备脾淋巴细胞悬液，采用ELISpot法测定预测多肽诱导脾淋巴细胞分泌IFN-γ的能力，根据分泌IFN-γ形成的特异性斑点数进行生物统计学分析，发现2条多肽产生的斑点数显著高于无关肽刺激组（P＜0.01）。确定了针对小鼠H-2 kb的限制性T细胞抗原表位的2条多肽。这些可用于合成特异性的MHC-肽四聚体，为后续研究NDV与树突状细胞（dendritic cells，DC）及T淋巴细胞之间的免疫抑制机制提供重要保障。

新城疫病毒；NP蛋白；CTL表位；筛选

新城疫（Newcastle disease, ND）是由副粘病毒科（Paramyxoviridae）、副粘病毒亚科（Paramyxovirinae）禽副粘病毒Ⅰ型引起禽类的一种烈性传染病，该病被国际兽医局（OIE）列为必须上报的A类疫病之一[1]。新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）基因组为不分节段、单股负链RNA，病毒粒子的外部是来自宿主细胞膜的双层脂质囊膜，内部为螺旋对称的核衣壳[2]，其中……