邢大伟 张鑫 杨鹏麟

miRNA-34a对无血清培养诱导心肌细胞凋亡的影响及机制研究

邢大伟 张鑫 杨鹏麟

目的 探讨miRNA-34a（miR-34a）对无血清培养诱导的大鼠心肌细胞凋亡及B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）表达水平的影响。方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2，实验分实验组（转染miR-34a inhibitor）、空白对照组（无转染miR inhibitor）和阴性对照组（转染随机合成NC microRNA片段）。转染24h后无血清培养饥饿诱导细胞凋亡，Western bolt法检测Caspase-3及Bcl-2的表达。结果 实验组细胞Caspase-3表达低于空白对照组和阴性对照组（P＜0．05）。Bcl-2表达明显高于空白对照组和阴性对照组（P＜0．05）。结论 转染miR-34a inhibitor可以下调miR-34a的表达，减少无血清培养诱导H9C2细胞的凋亡，Bcl-2的表达增加可能参与了其保护机制。

H9C2 miRNA-34a 凋亡 Bcl-2

miRNA是一类内源性短链非编码小分子RNA，长约21～25个核苷酸，通过其5＇端第2～8位核苷酸与靶基因mRNA的3＇URT互不配对实现了对靶基因的负向调节作用。至今已经被发现的miRNA超过1 000种。近年来大量研究证实miRNA参与许多细胞生物学过程的调节，包括增殖、凋亡、发育、分化及代谢等。目前冠心病作为一种中老年人群中常见病，发病率逐年增高，严重影响人类的健康。大量动物实验证实无论是急性冠状动脉综合征还是隐匿性心肌缺血均对心肌造成严重损伤，促进心肌细胞凋亡及坏死[1-3]。本实验体外培养大鼠心肌细胞H9C2，无血清饥饿诱导细胞凋亡体外模拟心肌缺血状态，通过转染miR-34a inhibitor下调miR-34a的表达，观察其是否对饥饿诱导H9C2细胞凋亡具有保护作用，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 实验动物及试剂 大鼠胚胎心肌细胞株H9C2（2-1）购自中科院上海细胞库；……