蝎毒抗癌多肽对HL-60细胞凋亡及Bcl-2和p53基因表达的影响
2014-04-13庄海峰郑智茵庄晓芬周郁鸿沈建平
庄海峰 郑智茵 庄晓芬 周郁鸿 沈建平
蝎毒抗癌多肽对HL-60细胞凋亡及Bcl-2和p53基因表达的影响
庄海峰 郑智茵 庄晓芬 周郁鸿 沈建平
目的研究蝎毒抗癌多肽(APBMV)在体外诱导人急性粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的作用及其相关机制。 方法采用CCK-8法检测APBMV作用后HL-60细胞的增殖抑制率,光镜观察APBMV作用后HL-60细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测APBMV对相关凋亡基因蛋白表达的影响。 结果 CCK-8法显示APBMV能够抑制HL-60细胞增殖,其对HL-60细胞增殖的IC50为15.64μg/ml。流式细胞仪检测提示APBMV能诱导HL-60细胞凋亡,且呈浓度-效应关系。APBMV(16μg/ml)作用48h后,细胞凋亡率为(36.1±2.1)%,与正常对照组比较有统计学差异(P<0.05)。Western blot提示APBMV(4、8、12和16μg/ml)组的Bcl-2蛋白表达量分别为正常对照组的78.60%、54.60%、25.50%和4.20%;p53蛋白表达量分别为正常对照组的163.00%、271.00%、355.00%和447.00%。 结论 APBMV可有效抑制HL-60细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其机制可能与促进HL-60细胞内p53基因的表达,抑制Bcl-2基因的表达有关。
蝎毒 HL-60 细胞凋亡 Bcl-2 p53
全蝎为钳蝎科动物钳蝎的干燥全虫,中药药典中记载其具有清热解毒,熄风止痉,祛风除湿之功效。河南医科大学生物毒素中心利用分子筛层析技术进一步从东亚钳蝎粗蝎毒中分离提取出了蝎毒抗癌多肽(APBMV)[1],实验证明APBMV对人乳腺癌MCF-7细胞[2]、前列腺癌DU145细胞[3]、卵巢癌3AO细胞[4]等肿瘤细胞具有抑制增殖及诱导凋亡的作用。本实验通过体外实验观察APBMV对人急性粒细胞白血病细胞株HL-60的增殖与凋亡的作用并探讨相关机制,为蝎毒抗癌新药的开发利用提供一定的实验依据。
1 材料和方法
1.1 实验材料和仪器……
