张涛 张胜逆 李靖华 杨季红 商琰红 王晓春 李鹏 游冀鹏 张爱民 程树杰

肛门直肠畸形(ARM)是常见的小儿消化道畸形之一，严重影响患儿的生活质量［1－3］。ARM的预防和治疗的关键在于明确该畸形的基因调控和胚胎发生机制，普遍研究认为ARM是一组受多因素影响的，涉及多个基因的复杂畸形。最近国外学者在大鼠胚胎发育研究中发现Cdx1在哺乳动物尾端发育中起到了重要的作用，尤其是对于后肠的发育特别关键［4］。采用人类全基因组表达谱芯片技术对比分析正常和ARM患者直肠末端组织基因表达谱系的变化，结果显示有多个涉及Cdx1在高位ARM与正常人直肠末端组织中呈现差异表达［5］。据此我们推断Cdx1可能在泄殖腔和直肠的发育中起重要作用，与ARM的发生相关。而在胚胎期肛门直肠发育中Cdx1的时空分布模式仍不明确，Cdx1在ARM的发生过程中如何发挥的作用仍未得到满意的解释。因此，本研究应用乙烯硫脲(ethylenethiourea，ETU)致畸的Wistar大鼠的ARM 动物模型，分析Cdx1蛋白和mRNA在正常及ARM大鼠胚胎肛门直肠的时空分布规律，探讨Cdx1在大鼠胚胎肛门直肠发育过程中所发挥的作用;研究Cdx1/Tcf4与ARM胚胎发生机制的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 动物:体重250～300 g的Wistar大白鼠(购自中国医科大学动物实验中心并饲养，CMU-WR-102)，雌雄午夜合笼后次晨雌鼠阴道涂片，显微镜下见到精子即确认已交配，此日计妊娠第0天。ETU组:24只大鼠于妊娠第10天经胃管注入125 mg/kg的ETU。正常组:12只大鼠于妊娠第10天经胃管注入等量的0.9%氯化钠溶液。2组孕鼠分别做以下处理:分别于妊娠第13～16天，18天，21天正常组各取2只，ETU组各取4只孕鼠行剖宫术，取出所有胎鼠。……