曹艮元，闫国强

氯吡格雷（商品名波利维）一种临床常用的血小板聚集抑制剂，通过与血小板膜表面二磷酸腺苷（ADP）受体选择性的不可逆结合，继而抑制ADP介导的通路活化而发挥作用。氯吡格雷为药物前体，本身无活性，需被细胞色素P450（CYP）酶系转化为活性状态（clopidogrel）方可发挥作用，其中细胞色素P450 2C19（CYP2C19）的作用最重要［1］。CYP2C19酶由490个氨基酸组成，该酶在多种组织器官中均有分布，肝脏为主，参与多种药物的体内代谢［2］。CYP2C19基因多态性对CYP2C19酶活性起着决定性作用，基因多态性可影响对氯吡格雷活性的转化能力，从而对临床治疗效果产生影响，表现为药物疗效的个体差异［3］。研究表明，CYP2C19＊1（野生型）、CYP2C19＊2（无功能突变型）、CYP2C19＊3（无功能突变型）为亚洲人群常见等位基因类型［4，5］。本研究目的是建立CYP2C19基因多态性的检测方法（ARMS PCR），并且以 ADP诱导血小板聚集率分析CYP2C19基因多态性与氯吡格雷疗效的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 我院2011年—2012年体检健康人群，无药物过敏史，检测CYP2C19基因型，选择CYP2C19＊1／＊1野生型10例，CYP2C19＊2／＊2 or＊3突变型纯合子10例，CYP2C19＊1／＊2 or＊3突变型杂合子10例。其中男18名，年龄21岁～34岁（28岁±4岁），女12名，年龄20岁～35岁（29岁±5岁）。研究对象受试前2周及受试期间禁烟、酒，并且不服用任何药物。

1.2 基因分型 利用ARMS PCR技术建立CYP2C19基因多态性检测方法，设计特异性引物和探针序列，引物和探针委托生工生物工程（上海）有限公司合成及纯化。样本处理：抽取受试者静脉血3 m L，EDTA抗凝，利用基因组提取试剂盒纯化核酸，基因组提取试剂盒购自北京天根生化公司，按照其说明书操作。Taq酶扩增系统购自上海Promega公司。……