微小RNA-155反义寡核苷酸对乳腺癌MDA-MB-157细胞及裸鼠移植瘤的作用
2014-03-23郑书荣郭贵龙黄奇迪黄督平尤捷黄关立
郑书荣,郭贵龙,黄奇迪,黄督平,尤捷,黄关立
(温州医科大学附属第一医院 肿瘤外科,浙江 温州 325015)
微小RNA-155反义寡核苷酸对乳腺癌MDA-MB-157细胞及裸鼠移植瘤的作用
郑书荣,郭贵龙,黄奇迪,黄督平,尤捷,黄关立
(温州医科大学附属第一医院 肿瘤外科,浙江 温州 325015)
目的:探讨微小RNA-155(microRNA-155,miR-155)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)对乳腺癌MDA-MB-157细胞增殖、凋亡及裸鼠移植瘤的作用。方法:设计合成化学修饰的miR-155 ASO,通过LipofectamineTM2000转染MDA-MB-157细胞,激光共聚焦检测转染率,real-time PCR测定转染后miR-155表达水平的变化,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,观察miR-155 ASO对裸鼠成瘤能力的影响,免疫组织化学法检测瘤体组织Caspase-3的表达。结果:激光共聚焦检测转染率达80%以上。转染miR-155 ASO后,miR-155表达明显下降,细胞增殖能力降低,凋亡增加。miR-155 ASO能明显抑制裸鼠移植瘤生长,抑制率为52.98%,并且能显著增加Caspase-3的表达。结论:miR-155 ASO能显著下调miR-155的表达水平,继而抑制乳腺癌MDA-MB-157细胞的增殖,促进其凋亡;并且通过增加靶基因Caspase-3的表达,抑制裸鼠移植瘤的生长,为miR-155作为乳腺癌治疗靶点提供了实验依据。
乳腺肿瘤;微小RNA-155;反义寡核苷酸;MDA-MB-157细胞;裸鼠
微小RNAs(microRNAs,miRNAs)是近年来发现的一类长度为约20~24个核苷酸的单链非编码小分子RNA,通过与靶基因完全或不完全互补结合形式来负调控基因表达,参与调节细胞的代谢、增殖、分化和凋亡等基本生理过程[1-2]。诸多研究表明miRNAs的表达异常与多种肿瘤的发生发展密切相关。乳腺癌是目前威胁妇女健康的最常见恶性肿瘤之一。我们的前期研究已证实miR-155在乳腺癌中呈高表达,并与临床病理因素显著相关[3]。……
