辛德莉 李丹 米佳

1 首都医科大学附属友谊医院北京热带病研究所 （北京 100050）

2 北京蓝谱生物科技有限公司 （北京 100081）

与传统的核酸扩增检测的方法聚合酶链式反应（PCR）相比，LAMP®方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强，反应结果判定简单，检测成本低等特点。LAMP®方法的检测灵敏度高于普通PCR 2～3 个数量级，而且，LAMP®的扩增是一个等温过程（60～65˚C），扩增时间短（1h），对设备的要求简单，只需要一个水浴锅或恒温装置即可完成。LAMP®反应结果的检测也很简单，不需要像普通PCR 那样进行凝胶电泳，只需要通过肉眼直接观察白色浑浊或者绿色荧光即可，是一种简便、快捷、适合进行临床及大量样品的高通量检测方法。

LAMP®技术已在医疗、动植物、水产、食品、环境领域的病毒、细菌、寄生虫等方面得到广泛应用，如Yiyue et., al 利用LAMP®技术快速检测H7N9 病毒，灵敏度可达10 拷贝，具有非常好的特异性[2]。Jianyu et., al 利用环介导等温扩增法，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA 基因为靶基因，特异的检测出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的，灵敏度能达到10 拷贝DNA 或10CFU/反应[3]。Jaymin C et., al 采用环介导等温扩增法特异的检测疟原虫，灵敏度和特异性均与金标准槽式PCR 一致[4]。但是在支原体上的研究较少，李鹏等建立了猪肺炎支原体的环介导等温扩增诊断方法，其灵敏度可达6 拷贝，且具有很好的特异性[5]。谢秀兰等建立的羊丝状支原体簇的快速环介导等温扩增检测方法，检出限为10pg/µl[6]。

肺炎支原体是一种介于病毒和细菌之间，能独立生活的最小微生物，缺乏细胞壁，呈现出高度多型性，是人类支原体肺炎的病原体。……