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长座虫草子实体和菌丝体中碱基和核苷类物质的HPLC分析

2014-02-14程文明李春如陆维丽

安徽医科大学学报 2014年9期

张 勋,程文明,2,李春如,吴 昆,陆维丽,李 俊

长座虫草子实体和菌丝体中碱基和核苷类物质的HPLC分析

张 勋1,程文明1,2,李春如3,吴 昆1,陆维丽1,李 俊1

建立高效液相色谱法同时测定长座虫草中13种核苷和碱基类物质,色谱条件为:TSKgel ODS-100V色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.01 mol/L KH2PO4水溶液系统为流动相,梯度洗脱,流速1 ml/min,检测波长260 nm,柱温20℃。13种成分在50 min内均达到基线分离,线性关系良好(r≥0.999 0,n=8);平均回收率在98.4%~107.5%(RSD<2.0%,n=5)。结果表明长座虫草子实体中胞嘧啶、次黄嘌呤含量相对较高;菌丝体中尿嘧啶、鸟苷、腺苷含量较高,尿苷在菌丝体和子实体中含量均较高。

长座虫草;高效液相色谱;核苷;碱基;提取;含量测定

长座虫草(Ophiocordyceps longissima)是寄生于同翅目蝉若虫上的一种重要的虫生真菌,1963年,首次在日本发现并命名。1999年,李春如等[1]在国内首次采到此虫草,经鉴定,其无性型为长座被毛孢Hirsutella longissima,并成功培育出未成熟的子座和孢梗束。目前有关长座虫草的研究尚集中在生态学和培养方法方面[2],对化学成分研究少见报道。虫草含有多种有效成分,包括核苷、多糖、甾醇、肽类、有机酸等,具有抗肿瘤、抗氧化抗炎、神经系统、心血管系统、免疫调节等多种药理作用[3-5]。核苷类物质为虫草中主要活性成分之一,其检测方法主要有高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、毛细管电泳法、薄层色谱扫描法等[6-7]。HPLC法为最常见的核苷测定方法,但采用HPLC对13种核苷和碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺苷、鸟苷、胞苷、尿苷、β-胸苷、肌苷、虫草素)同时测定尚属首次。该研究对长座虫草子实体及菌丝体中13种核苷和碱基同时进行分析,为建立和提升长座虫草及其制品的质量控制方法提供实验依据。……

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