木朝宇，庄晓亮，赵 俊，陈敬贤，2，王明丽

VP4基因鉴定非EV71非CoxA16手足口病病原体漏检的研究

木朝宇1，庄晓亮1，赵 俊1，陈敬贤1，2，王明丽1

目的探讨肠道病毒VP4基因通用引物PCR诊断非肠道病毒71型（EV71）非柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）手足口病（HFMD）病毒方案的准确性。方法通过肠道病毒VP4基因通用引物PCR鉴定阜阳地区非EV71非CoxA16 HFMD病毒时，显示两例病毒分离株为Sabin-1（命名为Fy-01和Fy-02株）。分别采用引物EVP4／Q8和VP1特异性引物对Fy-01和Fy-02分离株进行鉴定。结果采用VP4基因PCR扩增产物测序证实，两例病毒分离株为Sabin-1，而采用EVP4／Q8引物PCR扩增Fy-01分离株却存在异常的扩增条带，PCR扩增产物测序结果为柯萨奇病毒A组10型（Cox-A10）；将VP4基因PCR产物制备成克隆载体挑选多个单克隆测序结果显示，Fy-01分离株既存在Sabin-1 VP4基因，又存在CoxA10 VP4基因，证实为两种毒株混合感染。结论

手足口病；VP4基因；Sabin-1；CoxA10

近年来，非肠道病毒71型（human enterovirus 71，EV71）非柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16，CoxA16）引起手足口病（hand foot and mouth disease，HFMD）暴发流行引起了人们的注意。2008年新加坡的HFMD大爆发中，CoxA6和CoxA10造成的患者占总患者人数的35.3%［1］。2008年芬兰HFMD爆发确定由CoxA10和CoxA6引起［2］。2010年法国爆发HFMD患者中，CoxA10比例为39.9%，CoxA6比例为28%。2008年西班牙爆发的脱甲病确认是由CoxA10引起的［3］。我国深圳市也报道过非EV71非CoxA16的人类肠道病毒（human enterovirus，HEVs）引起的HFMD的流行［4］。自我国山东

临沂市以及安徽阜阳市爆发由EV71引起的HFMD以来，其病原学监测都集中在EV71和CoxA16［4］上。非EV71非CoxA16的其他引起HFMD病原体仅仅通过肠道病毒通用型引物进行检测。目前国内对非EV71非CoxA16的HEVs检测时，常采用VP4基因进行型别鉴定［5－7］，而该研究显示，仅采用VP4基因PCR产物测序，尤其是HEVs混合感染引起的HFMD，其结果并不完全可靠，现将结果报道如下。……