细节对高效液相色谱法检测结果准确性的探讨
2013-12-21花素静
商丘职业技术学院学报 2013年5期
花素静,杨 铭,梁 军
(1.郑州市兽药饲料监察所,河南 郑州 450002; 2.商丘职业技术学院 生物工程系,河南 商丘 476000)
高效液相色谱法(high performance liquid chromatographu,HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等.高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析.该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术[1]36-38.
高效液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高、应用范围广、分析速度快等优点.在进样量为μL数量级的情况下,常规紫外检测器的灵敏度可达0.01ng,并可以分析70%以上的有机化合物.大多数样品在30 min内可完成分析,甚至有些样品在5min内即可完成分析.此外,高效液相色谱法还具有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点.但进行高效液相色谱分析时,从样品处理到上机,每一个细节都要处理得当,否则,就会造成分析结果相对偏差较大.依据行业标准,含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少注样2次,由全部结果(n>=4)求得平均值,相对标准偏差(RSD)一般应不大于1.5%[2]3. 本文以注射用青霉素钾为试验样品,操作严格依据2010年版《中华人民共和国兽药典》一部标准[3]3,通过两台高效液相色谱仪间的比对试验,详细分析说明该问题.
