彭乃杰， 林哈妮， 夏 菲， 李克诚， 张 青， 葛少红

(瑞安市人民医院检验科，浙江瑞安325200)

碳青霉烯类抗菌药物被认为是为数不多的可有效治疗高产 AmpC酶和超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)多重耐药菌引起的严重感染的药物之一。然而，随着碳青霉烯类药物在临床中的大量、广泛应用，碳青酶烯类耐药的肠杆菌科细菌不断增加。其机制主要是细菌产生的碳青霉烯酶能够水解碳青霉稀类抗生素。肺炎克雷伯菌产生碳青霉烯酶主要为产KPC酶。KPC是一种质粒介导的Ambler分类B类酶，能水解几乎所有的β-内酰胺酶和碳青霉稀类抗菌药物。

多位点序列分型(MLST)通过测序来揭示保守基因的等位基因突变来对病原菌进行分型和鉴定。由于不同实验室能通过网络与基于核苷酸的DNA数据库进行比对，且基于DNA的模式能更好的反应菌株间的遗传变异情况，使得MLST技术在了解流行病学特征、病原菌的传播途径、追溯传染源及临床传染性疾病诊断中发挥了重要作用。

由于本地区尚缺乏碳青霉稀类耐药肺炎克雷伯菌的耐药机制和分子流行病学资料。因此，我们使用MLST和Minimum spanning trees分析研究本地区碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌基因特征和遗传性质。

一、材料和方法

1.菌株来源 收集瑞安人民医院2010年1月至12月临床分离的耐碳青霉烯类抗菌药物的肺炎克雷伯菌8株。

2.仪器与试剂 Vitek2全自动微生物系统及其配套的鉴定卡(法国生物梅里埃公司)，E-test试条(瑞典AB BIODISK公司产品)。

3.菌株鉴定 分离纯化菌株，采用Vitek2全自动微生物系统及其配套的鉴定卡。……