张 炜， 应春妹

(上海交通大学医学院附属仁济医院检验科，上海200127)

侵袭性念珠菌引起的深部真菌感染的上升，已经成为一个严重的公共健康问题［1］。随着免疫抑制剂在临床的广泛使用，免疫缺陷人群的增多尤其是获得性免疫缺陷综合征患者的增加，目前白念珠菌在临床的分离率有所下降，而非白念珠菌，尤其是光滑念珠菌等引起的感染明显增加［2］。由于光滑念珠菌对常用抗真菌药物包括两性霉素B的敏感性低，且对三唑类抗真菌药物的最低抑菌浓度值偏高，可对三唑类药物原发耐药，也可出现继发耐药。耐药的发生是一个多水平、多因素参与的复杂过程。念珠菌对唑类药物耐药机制的研究已经成为当今医学研究的热点，但国内目前在念珠菌耐药性尤其是光滑念珠菌耐药性方面的研究仍然较少。因此，我们采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)对光滑念珠菌临床分离株ERG11、CDR1和CDR2基因表达的mRNA进行相对定量，从而探讨基因表达与耐药之间的关系。

材料和方法

一、材料

1.试验菌株 光滑念珠菌临床菌株共22株，其中对氟康唑耐药11株(编号分别为NSG-1、DF-1、DF-2、DF-3、DF-5、DF-7、DF-8、DF-10、DF-17、DF-18、DF-20)、剂量依赖性敏感 3 株(EME-1、SUR-2、SIC-1)、敏感 8 株(NSG-7、NSG-3、NSG-4、SUR-1、RES-2、WFF-1、SIC-2、OST-1)，均由仁济医院检验科鉴定并保存。试验菌株药物敏感性分析方法及结果判定参考文献［3］。质控菌株为近平滑念珠菌(ATCC 22019)和克柔念珠菌(ATCC 6258)，由瑞金医院卢湾分院检验科惠赠。

2.主要试剂与仪器 Trizol试剂 (美国Invitrogen公司);DEPC(北京鼎国昌盛公司);氯仿、异丙醇、无水乙醇(上海化学试剂公司……