汪文来，赵红霞，金香兰，张 玲，王 震，卢贺起，岳广欣，于 峥，张立石

(中国中医科学院中医基础理论研究所，北京 100700)

更年期综合征［1］中医常将其归属于绝经前后诸证、郁证及脏躁，是由于妇女年届七七，肾气渐衰，天癸将竭，冲任二脉空虚，精血亏乏，脏腑失去濡养，加之情志因素，使阴阳失调和脏腑之间失去平衡而发病。以月经紊乱、烘热汗出、烦躁失眠、腰酸乏力等为主症。本实验以去势雌性更年期模型大鼠为研究对象，探讨大补阴丸及加减方的干预效果。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 选用 SPF级 Wistar大鼠76只，体质量200±10g，由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供(许可证号 SCXK-(军)2007-004)。大鼠饲养和实验均在中国中医科学院中医基础理论研究所清洁级实验动物室内进行(实验动物室许可证号SYXK(京)-2005-0024)。

1.1.2 药物 大补阴丸为杭州胡庆余堂药业有限公司生产的水蜜丸(批号101227)。大补阴丸加减方由知母、熟地、炒黄柏、醋炙龟板、丹皮、三七等药组成。大补阴丸水蜜丸粉碎成细粉，以蒸馏水配成1∶2(药∶水);大补阴丸加减方以水煎煮浓缩至1g/mL，均置4℃冰箱备用。

1.1.3 主要试剂 FSH、LH的 ELISA试剂盒为武汉Uscn公司生产。

1.1.4 主要仪器 酶标仪:美国Biotek公司。

1.2 方法

1.2.1 分组及处理 先将76只大鼠随机分为3组，其中空白对照组10只，假手术组10只和造模组56只。造模组大鼠用戊巴比妥钠麻醉后摘除双侧卵巢［2］，假手术组只摘取卵巢周围少许脂肪组织。术后常规饲养60d，在造模成功的大鼠中选取56只，按体质量均衡随机分为4组，其中模型组14只，阳性对照组14只，大补阴丸组14只，大补阴丸加减组14只，然后开始给药。大补阴丸组灌胃给予浓度为 1g生药/2mL的水溶液，即每天灌服 0.75mL/100g/体质量，相当于服生药 0.375g/100g/体质量。大补阴丸加减组灌胃给予浓度为1g生药/mL的水煎剂，即每天灌服1.54mL/100g/体质量，相当于服生药1.54g/100g/体质量。阳性对照组灌胃给予0.008mg/mL的己烯雌酚，给药体积为0.9mL/100g/体质量，给药量相当于 0.0072 mg/100g/体质量。以上灌胃给药3个月，每天1次，连续6d，休息1d，再连续给药6d。空白对照组、假手术组、模型组按上法灌服等体积的纯净水。其余各组根据动物体质量计算给予相应量的药液。动物给药90d后，空腹状态、麻醉，腹主动脉取血、离心，分离血清，－80℃低温保存。每周称体质量1次。

1.2.2 外周血血清中促卵泡激素(FSH);促黄体生成激素(LH)含量的检测 采用ELISA法检测血清FSH和LH的含量。具体步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.2.3 肾上腺指数的检测 大鼠处死前禁食12h，麻醉后开腹取材。经腹主动脉采血检测变化，取肾上腺称量其重量与体质量之比计算肾上腺指数(脏器指数=脏器质量mg/体质量g×100)。

1.3 统计学方法

实验结果皆以均数±标准差(珋x±s)表示，采用方差分析(ANOVA)，组间两两比较，采用q检验。

2 结果

2.1 大补阴丸及加减方对去卵巢大鼠所致更年期综合症大鼠血清中FSH含量的影响

表1 各组大鼠血清FSH水平的比较(珋x±s)

表1显示，模型组大鼠血清 FSH水平显著升高，阳性对照组与模型组比较(P＜0.01)，差异有统计学意义。大补阴丸与模型组比较(P＜0.05)，FSH显著降低。大补阴丸加减组与模型组比较(P＜0.01)，差异有统计学意义。

2.2 大补阴丸及加减方对去卵巢大鼠所致更年期综合症大鼠血清中LH含量的影响

表2显示，模型组大鼠血清LH水平显著升高，阳性对照组与模型组比较(P＜0.01)差异有统计学意义。大补阴丸及加减组与模型组比较，LH显著降低(P＜0.05)。

2.3 大补阴丸及加减方对去卵巢大鼠所致更年期综合症大鼠体质量的影响

表3显示，与空白对照组和假手术组比较，模型组大鼠体质量明显增加(P＜0.01);与模型组比较，大补阴丸及加减组、阳性对照组大鼠体质量明显降低(P ＜0.01)。

表2 各组大鼠血清LH水平的比较(珋x±s)

表3 各组大鼠体质量水平的比较(珋x±s)

2.4 大补阴丸及加减方对去卵巢大鼠所致更年期综合症肾上腺指数的影响

表4 各组大鼠肾上腺指数的比较(珋x±s)

表4显示，与空白对照组和假手术组相比，模型组大鼠肾上腺指数明显降低(P＜0.01)。与模型组相比，阳性对照组肾上腺指数显著升高(P＜0.01)，大补阴丸及加减组肾上腺指数明显升高(P＜0.05)。

3 讨论

大补阴丸原名叫“大补丸”，出自元代医学家朱震亨所著《丹溪心法》一书。该方系朱氏滋阴降火学说的代表方，由熟地黄、炙龟板、黄柏、知母、猪脊髓组成，其组方体现了丹溪“阳常有余，阴常不足”的学术思想，用药强调泻相火而补肾阴，因此本方是用于治疗妇女更年期综合征的有效方法之一。大补阴丸加减方是在大补阴丸原方基础上加入丹皮、三七等清热凉血、活血化瘀之品，达到滋阴补肾、化瘀活血、养血填精之效，从而治疗更年期综合征。

更年期综合症主要表现为生殖内分泌功能障碍与植物神经功能失调的一组证候群。现代医学认为，更年期妇女由于卵巢功能衰退，雌激素分泌逐渐减少，体内仅有低水平的雌激素，是其发生更年期综合症的主要原因。FSH、LH均由腺垂体分泌，其中FSH可促进卵泡的各种细胞生长发育以利于生殖细胞的成熟，并可促进新细胞合成FSH受体，从而增强FSH对卵泡生长发育的作用;而LH可使颗粒细胞黄素化并分泌黄体酮。由于雌激素不足，对下丘脑-垂体不能进行有效的负反馈，致使垂体分泌促性腺激素增加［3］。

本实验选择去势的造模方法，切除双侧卵巢(OVX)而人为制造卵巢功能突然减退的环境来模拟更年期综合症发生。结果表明，与空白对照组比较，模型组大鼠血清 FSH、LH(P＜0.01)水平明显升高。阳性对照组与模型组比较(P＜0.01)，差异有统计学意义。大补阴丸及加减方能显著降低OVX大鼠FSH、LH及体质量水平，并能明显升高大鼠肾上腺指数。实验结果与更年期妇女生殖内分泌情况一致。说明妇女进入更年期后，卵巢功能逐渐衰退，雌激素水平下降，导致下丘脑-垂体-卵巢轴的平衡失调，出现植物神经功能紊乱等一系列症状，如月经紊乱、烘热汗出、烦躁失眠等。大补阴丸及加减方通过滋阴降火、养血填精调节和改善更年期综合征症状。本实验证实，大补阴丸及加减方可纠正模型大鼠FSH、LH激素水平，使其向正常平衡恢复，具有降低OVX大鼠体质量增速过快作用，能缓解OVX大鼠肾上腺萎缩状况，对妇女更年期综合征防治具有积极意义。

［1］ 许丽绵，欧阳惠卿，卢如玲.更年期综合征病因病机及其证治述要［J］.中医药学刊，2003，21(9):1550-1552.

［2］ 鞠大宏，张春英，王安民，等.温补肾阳方对去卵巢所致骨质疏松症大鼠IL-1和IL-6活性的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2000，6(4):29-32.

［3］ 叶玉妹，杨慰，韩文均，等.宁神颗粒对实验性更年期雌性大鼠性激素和免疫功能的影响［J］.时珍国医国药，2012，23(2):344-346.