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光镜下伯氏嗜木螨主要发育期的形态学观察

2013-09-20孙恩涛姜玉新李朝品

皖南医学院学报 2013年5期
关键词:刚毛光镜雌性

陈 琪,刘 婷,孙恩涛,姜玉新,李朝品

(皖南医学院 医学寄生虫学教研室,安徽 芜湖 241002)

伯氏嗜木螨作为一种常见的孳生螨,其分布较为广泛[1],对人类健康和储藏物的品质均有危害,有报道在病人外耳道乳突腔、尿液中发现此螨[2-3],也有报道称此螨在地鳖虫养殖场孳生严重[4]。但是纵观国内外文献,我们发现有关伯氏嗜木螨形态学研究报道极少,李长福[5]、李朝品等[1,6]曾对此螨有过描述,但均缺少清晰、直观的图片。2012年6月,作者在某饲料厂进行孳生螨调查时发现此螨,制备玻片标本,光学显微镜对该螨的主要发育期的形态进行观察,并拍摄了一些特征性的形态图片,为此螨的生物学分类与鉴定提供客观依据。

1 材料与方法

1.1 主要仪器和试剂 Nikon体视显微镜(SMZ 800型,日本尼康),光学显微镜(日本 OLYMPUS,BX-51 型),电热集螨器(Tullgren,HN-89),电动震筛机(85A-B),电子温湿度计(DWS508C/D型,北京市亚光仪器有限责任公司),奥氏保存液(70%乙醇87份,冰醋酸8份,甘油5份),贝氏封固剂(阿拉伯树胶30 g,水合氯醛5 g,甘油 20 ml,蒸馏水50 ml),无水乙醇,中性树胶。

1.2 样本来源 2012年6月,在芜湖市某饲料厂仓库采集饲料样本,装入洁净的标本袋中,带回实验室分离观察。

1.3 标本分离与制作 将所得样本放入电热集螨器(Tullgren)[7]中,24 h后取出收集瓶,将所得粉螨妥善保存。因集螨器筛子上的样本仍可能有粉螨残留,故需过40目和80目/吋分样筛,取80目/吋筛网上剩余物,直接镜检(directicopy)将螨分离出来,蒸馏水震荡洗涤,热酒精(70℃)处死,置于滴有封固剂的载玻片上,调整姿势使其肢体伸展,盖上盖玻片置入烘箱中48 h,烤干后用中性树胶封片,待自然风干后置光镜下观察。因热酒精处理后的螨虫肢体疲软,蛋白变性,制片效果不佳,后期直接用活螨制片。

2 结果

2.1 雌性成螨 扁椭圆形,大小为650~900μm×500~600μm,无色半透明,表皮光滑有光泽。有4对附肢、1对螯肢和1对须肢,均呈淡棕色。腹部膨隆,常可见1~8枚椭圆形卵,基节上毛(PS)光滑,且较其他背毛明显(图1)。后半体背面,可见背毛4 对(d1、d2、d3、d4),其中 d1 最短,d2 最长,d4 超出躯体末端;前侧毛(la)和后侧毛(lp)较肩内毛(hi)长,末端有肛后毛3对(pa1、pa2、pa3)(图2)。

图1 雌性成螨腹面观(×200)Fig 1 Ventral view for the adult female mite(×200)图2 雌性成螨侧面观(×200)Fig 2 Lateral view for the adult female mite(×200)

2.1. 1 颚体 颚体狭长,1对粗大的螯肢左右分布,末端分叉成内缘锯齿状的活动螯钳,为更清楚地观察须肢,将螯肢与躯体分离(图3);1对须肢在螯钳下,成三角状,上有感器附着;颚体背面的1对顶内毛(vi)较明显。胛外毛(sce)比胛内毛(sci)长3~4 倍,基节上毛(supra-coxal seta ps)、hi、la均清晰可见,且较d1长(图4)。

2.1. 2 腹面 生殖感觉器位于虫体腹面足Ⅲ之间,生殖区呈心形,雌螨生殖孔为一纵缝,两生殖瓣合成舟状,末端分开形成产卵孔,周围有3对生殖毛(i1、i2、i3),其中i1距i2的距离长于i2与i3(图5)。肛门周围生有6对微小的肛毛(a),其中2对位于肛门前端两侧,4对围绕在肛门后端,其中 a1、a4、a6较其他肛毛短(图6)。

图3 脱落的螯肢、须肢(×400)Fig 3 Sloughed chelicera and pedipalp(×400)图4 颚体背面观(×400)Fig 4 Dorsal view for the gnathosoma(×400)

图5 生殖区(×400)Fig 5 Aspect for the genital area(×400)图6 肛区(×400)Fig 6 Aspect for the anal area(×400)

2.1.3 足各足较细长,分四节,节间具有明显的关节结构,第1、2附肢相同,第3、4附肢相同。第1和第2附肢较细长,前跗节发达,各跗节远端附有感觉棒(ω),跗节Ⅰ的第一感棒(ω1)顶端膨大,着生于芥毛(ε)的同一凹陷上;末端为钩状的爪,正中端毛(f)和侧中毛(ra)呈镰状且顶端膨大呈叶片状,腹中毛(wa)粗刺状。胫节毛gT和hT刺状,hT比gT粗大。各附肢末端均见一镰状钩(图7);第3、4附肢附着的刚毛和感器较1、2附肢明显减少,第4附肢末节远端有吸盘(ambulacra,aa)1对(图8)。

图7 第1、2附肢(×400)Fig 7 The 1st and 2nd appendage(×400)图8 第3、4附肢(×400)Fig 8 The 3rd and 4th appendage(×400)

2.2 雄性成螨 纺锤形,较雌性成螨小,大小500~700μm×300~400μm。躯体四肢与雌螨无差异,但背毛(d)较雌螨更长。生殖区可见圆形的肛门吸盘,阳茎为一条挺直的管状物,骨化明显。肛后毛pa1、pa2、pa3清晰,但不易比较长短(图9)。

2.3 卵 长椭圆形,长120~160μm,宽60~110 μm,无色半透明,卵壳薄且光滑,内填有絮状物,呈不规则饰纹,颜色较暗,形态分辨不清。有时可见未发育成熟的幼螨(图10)。

图9 雄性成螨(×200)Fig 9 Adult male mite(×200)图10 卵(×200)Fig 10 The egg(×200)

2.4 幼螨 圆锥形,体较小,大小为300~450μm×150~200μm。在基节Ⅰ区可见较长的中空管子——基节杆(CR),分近端的胸柄(bruststiele)和远端的克氏器(claparede's organs)两部分,是端部延长的中空杆状物,与感棒相似。后半体发育不完全,躯体上的某些刚毛或感棒缺如。没有相当于生殖器的构造,也无生殖吸盘和生殖刚毛,仅见肛门和一对肛毛a,位置同雌性成螨的a5,较之粗大明显。足3对,节数与成螨相同,但转节上无刚毛,这是鉴别成螨幼螨的特点之一。其骶毛sa特别长,第1感棒ω1与跗节相比也较大(图11、12)。

图11 幼螨腹面观(×400)Fig11 Ventral view for the larva(×400)图12 幼螨侧面观(×400)Fig12 Lateral view for the larva(×400)

3 讨论

伯氏嗜木螨(Caloglyphus berlesei Michael,1903),隶属于蛛形纲(Arachnida)蜱螨亚纲(Acari)真螨目(Acariformes)粉螨亚目(Acardida)粉螨科(Acaridae)嗜木螨属(Caloglyphus)[5-7]。嗜木螨属(Caloglyphus Michael,1903)目前已记述了植食性螨、食菌螨、腐食性螨、捕食性螨等种 。其中,伯氏嗜木螨性喜高温潮湿,常孳生于潮湿发霉的储藏物,如谷物饲料、花生、中草药等,是储藏物的主要害虫之一。该螨的分泌物、排泄物和死亡的螨体裂解物均具有较强的变应原性,可引起螨性皮炎、过敏性哮喘、过敏性鼻炎、肺螨病等多种变态反应性疾病[8-13]。

了解孳生螨的形态特征是鉴定该螨的主要方法,我们通过光镜观察伯氏嗜木螨各发育期形态发现,幼螨的主要鉴别特征是:足3对,无第4对足,背毛3对,腹面基节杆发达;成螨的主要变化在于生殖区和肛区,生殖感觉器骨化明显,雄性和雌性成螨的生殖区刚毛数量上有明显差异,雄性成螨仅有1对刚毛,而雌性成螨则有3对生殖毛。上述这些变化和形态与李朝品[1]和 Hughes[14]对该螨形态的描述相符。纵观国内外文献,未见关于此螨卵形态的描述,本次观察到的卵均呈椭圆形,但卵的大小和卵壳的透明度差异较大,这可能与卵的发育和营养状况有关。

综上所述,光镜下直接观察螨类的形态特征进行螨种鉴定是常用的生物分类方法[15-16],具有制片简单、无需复杂仪器设备等优点。尤其是在光镜下,螨虫的形态特征清晰明了,并且保持其原始状态,色彩不会失真。但遗憾的是,光镜下观察其微小结构时,图片清晰度欠佳,系透光度较高的结果,容易被忽视,本实验组下一步将结合扫描电镜进行观察,力求更加细致、真实地揭示该螨的外部形态。

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