华哲云，褚 维，宋黎黎，王 宇，高淑娜，劳宝法

(上海市黄浦区疾病预防控制中心，上海 200023)

2013年4月1日，中国国家卫生和计划生育委员会向世界卫生组织(WHO)通报了3例人感染H7N9禽流感病例。引起此次疫情的H7N9禽流感病毒[avian influenza A(H7N9)virus 2013]是一种新型的重组禽流感病毒，其基因组8个片段中血凝素(hemagglutinin，HA)基因来自北京燕雀 A(H7N3)，神经氨酸酶(neuraminidase，NA)基因来自韩国野禽A(H7N9)，其余6个基因片段均来自浙江鸭A(H9N2)[1]。人感染H7N9禽流感病情发展迅速，可快速进展为急性呼吸窘迫综合征，死亡率极高[2]。由于人感染H7N9禽流感临床症状的非特异性，对疫情的确诊和控制只能依赖于实验室的检测结果，所以建立一套稳定的H7N9病毒核酸实验室检测方法是疫情防控的关键。为此，我们对4种不同的实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂开展了检测效果比对，以确立检测方法并提供更可靠的实验结果，同时还分析了不同标本的病毒核酸检出情况，为今后不明原因肺炎及禽流感病例监测的采样工作提供建议。

材料和方法

一、对象

1.病例定义 人感染H7N9禽流感监测病例需同时具备以下4项条件:(1)发热(腋下体温≥38℃以上;(2)具有肺炎的影像学特征;(3)发病早期白细胞总数降低或正常，或淋巴细胞分类计数减少;(4)不能从临床或实验室角度诊断为常见的病原所致肺炎[3]。

2.标本类型、采集、保存和运输 及时采集患者上呼吸道标本(鼻咽拭子、鼻腔抽取物、咽漱液和鼻洗液等)和下呼吸道标本(气管吸取物、肺泡灌洗液、痰液等)。拭子标本采集使用塑料杆的聚酯纤维拭子，采集后的标本置于3 mL病毒采样液中，4℃保存，并使用生物安全转运装置及时将标本送至本实验室。……