绒毛细胞培养染色体分析及50例核型报道
2013-09-11王玉萍武其文
检验医学 2013年8期
王玉萍,浦 春,武其文
(皖南医学院附属弋矶山医院检验科,安徽 芜湖 241001)
染色体病是由于先天性的染色体数目及结构异常引起的疾病,新生活婴染色体异常发生率约为0.73%,有效预防方法是行产前诊断进行出生前干预。介入性产前诊断的方法主要有绒毛、羊水、脐血染色体检查[1]。绒毛染色体检查适用于孕8~11周左右,能早期发现染色体异常,主要运用于及早进行诊断的应急病例和已停止发育的胎儿染色体分析。我们就绒毛染色体的培养、制作方法进行了探索,取得了满意的结果。
一、材料和方法
1.病例来源 所有50例病例均来自于皖南医学院附属弋矶山医院妇产科门诊自然流产孕妇,在行清宫术时留取标本,其中第1次自然流产者31例,第2次自然流产者19例,年龄21~32岁之间,B超确认孕周为8~11周之间。
2.试剂 细胞培养液,GIBCO生产的AmnioMAXTM-Ⅱ;胰蛋白酶购自湖南湘雅生物技术有限公司;胶原酶Ⅱ购自BOMEI公司;秋水仙素购自广州达晖公司;Giemsa染液购自湖南湘雅生物技术有限公司。
3.仪器 CO2培养箱由Thermo公司生产;超净工作台由苏州安泰空气技术有限公司生产;KX-21倒置显微镜、BX-51正置显微镜均为OLYMPUS公司生产。
4.方法 (1)标本留取:在孕8~11周流产孕妇负压吸宫时,无菌操作吸取绒毛组织放入无菌培养皿,加入无菌生理盐水约5 mL,清洗数遍即可。挑取绒毛约10 g放入另一培养皿,加入0.25%胰酶3 mL,再加入1%胶原酶Ⅱ6 mL,轻轻混匀,剪碎绒毛组织,放入37℃培养40 min;(2)标本培养:将上述悬液离心,弃去上清液,剩余约0.5 mL,加入细胞培养液5 mL,混匀,将……
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