胡进访，吴 雁，王白石，王 旭

(1.天津市泰达医院检验科，天津 300457;2.天津医科大学医学检验学院，天津 300203)

二胺氧化酶(diamine oxidase，DAO，E.C.1.4.3.6)是人和哺乳动物小肠黏膜绒毛和胎盘绒毛中具有高度活性的细胞内酶，在二胺(组胺、腐胺和尸胺)代谢中起催化作用，其与肠黏膜细胞核酸和蛋白质合成密切相关[1]，在分裂细胞中高度表达。血DAO活性的变化是反映小肠黏膜结构和功能状况的较理想指标[2]。我们根据 Kirsten 等[3]、Lorenz等[4]和 Hosoda等[5]介绍的方法，建立了双试剂连续监测法测定血中DAO活性。

材料和方法

一、仪器与试剂

岛津UV-VIS2450型紫外-可见吸收光谱仪，HITACHI 7600-020全自动生化分析仪，BECKMAN CX7全自动生化分析仪。1，4-丁二胺(腐胺)、DAO、还原型辅酶Ⅰ(nicotinamide adenine dinucleotide，NADH)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，ADP)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase，LDH)、谷氨酸脱氢酶 (glutamic acid dehydrogenase，GLDH)、α-酮戊二酸、血红蛋白、胆红素均购自美国Sigma公司;乙二胺四乙酸二钠购自Genview公司;医用脂肪乳及其他试剂均为国产试剂。

二、试剂配制

1.100 mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)缓冲液 精确称取12.153 g Tris，加入1.0 mL 5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠，用1.0 mol/L HCl调pH 值至8.0，定容至1000 mL。

2.试剂Ⅰ 按各自相对分子质量和酶活性取量，用 Tris-HCl缓冲液配制 0.3 mmol/L ADP、1000 U/L LDH、3000 U/L GLDH、5 mmol/L乙二胺四乙酸、10 mmol/L α-酮戊二酸溶液。

3.试剂Ⅱ 准确称取0.2668 g 1，4-丁二胺溶于 1000 mL Tris-HCI缓冲液中，浓度为3.2 mmol/L;0.25 mmol/L NADH。

三、研究对象

选择2006年1月至2009年12月在天津市第四医院烧伤病房住院的严重烧伤患者30例。所有患者烧伤早期均接受正规休克复苏治疗，休克期度过平稳，手术及创面换药按常规进行，于伤后第2天抽取静脉血，分离血清于－80℃冷冻保存备用。

从健康体检人群中选取临床诊断基本正常，肝功能、肾功能、血脂均正常，无肠道疾病的健康体检者150名，年龄18～55岁，男、女各75名，女性均为非妊娠期。……