张 念，马玉媛，向思龙，贾俊婷，吴健敏，章金刚

（1.吉林大学畜牧兽医学院，吉林长春 130062；2.军事医学科学院野战输血研究所国家生物医学分析中心/病毒安全检测实验室，北京 100850；3.广西壮族自治区兽医研究所，广西南宁 530001）

猪内源性反转录病毒（Porcine endogenous retrovirus，PERV）是与猪→人异种移植病原安全性密切相关的一类病毒。体外研究已证明PERV能够感染人源细胞[1]，这一发现引起了人们对异种移植病原安全性的广泛关注。

PERV属于反转录病毒科哺乳动物C型反转录病毒属，为单股正链RNA病毒，基因组全长为8.1 kb～8.9 kb，由5'非编码区、种群特异性抗原（gag）基因、聚合酶（pol）基因、囊膜（env）基因及3'非编码区组成，gag、pol基因相对env基因具有较高保守性，env基因主要决定其感染范围及细胞嗜性[2]。

五指山小型猪具有体型小、遗传稳定、耐粗饲等国外小型猪不可比拟的优点[3]，其基因组中PERV的基因序列拷贝数较低[4]，有望为异种移植提供合适供体。本实验室在前期研究初步表明：五指山来源的PERV-env序列中存在着较多的G→A突变。因此，本实验在前期研究基础上以连续3代次近交系五指山小型猪为研究对象，对其来源的PERV env基因变异特征（G→A突变）进行深入研究。此研究有助于PERV分子特性的研究，也一定程度上为猪→人异种移植中的病毒安全性评价提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 实验材料 连续3个代次（F18、F19、F20）近交系五指山小型猪耳组织（每代次3个样品，共9个样品），来自中国农业科学院北京畜牧兽医研究所。

1.2 主要试剂 rTaqDNA聚合酶、dNTP（10mM）、dATP（100mM）、DL2000/5000Marker、SalⅠ、XbaⅠ等购自TaKaRa公司；phusion高保真DNA聚合酶购自NEB公司；……