窦文文，李宏梅，成子强，刘建柱，刘海港，井维芳，崔治中，郭慧君

（山东农业大学动物科技学院山东省生物工程与疫病防治重点实验室，山东泰安 271018）

J亚群禽白血病病毒（Subgroup J avian leukosis virus，ALV-J）是上个世纪90年代从肉鸡中鉴定的一种新亚型白血病病毒，它引起骨髓细胞瘤病。中国首次在1999年从白羽肉鸡中分离到ALV-J[1]，近年来，ALV-J已传播到中国不同地区的某地方品系鸡[2-4]及蛋用型鸡[5-6]中。ALV-J的感染已在中国鸡群中广泛流行，给中国养鸡业造成严重的损失。

为控制ALV-J在中国地方种鸡中的流行，需要对我国地方种鸡实施净化。由于我国种鸡品系和种群数量大、饲养不规范和饲养密集等特点，可能需要较长时间的净化才能达到感染率非常低的防控要求；此外，还需要借助其他的防制方法降低鸡群的ALV-J感染率，以达到加快净化的目的[5]。使用疫苗预防是一有效的可选择方法，但对ALV-J至今尚未有有效的疫苗在生产中加以应用。

本研究通过原核表达ALV-J的gp85囊膜蛋白并采用不同免疫佐剂和免疫程序对雏鸡进行免疫接种，对其免疫保护作用进行研究，为开发有效的ALV-J亚单位疫苗提供实验依据。

1 材料和方法

1.1 病毒、细胞及实验动物 ALV-JNX0101株和单克隆抗体（MAb）JE9及DF-1细胞由本实验室保存；海兰褐1日龄雏鸡购自泰安市东岳种禽场，试验前进行ALV感染检测，全部为阴性者进行动物免疫接种试验。

1.2 质粒与菌株 pMD18-T simple vector试剂盒购自TaKaRa公司；pET-32a（+）载体购自Invitrogen公司；大肠杆菌（E.coli）DH5α和BL21（DE3）菌株均由本实验室保存。

1.3 主要试剂 常用核酸和蛋白等分子试剂购自TaKaRa公司；……