慢性髓系白血病（CML）是造血系统的恶性肿瘤，其特征是发生了相互的染色体移位 ［t（9；22）（q34；q11）］，产生了bcr／abl融合基因，编码了异常的酪氨酸激酶，促使疾病的发生与发展。当前，在bcr／abl融合基因阳性的病人中，酪氨酸激酶抑制剂甲磺酸伊马替尼（IM）是首选的治疗药物。然而，在许多病例中，发生了对伊马替尼的耐药，寻找一种CML治疗的替代或增敏药物，无疑是非常重要的。蟾蜍灵是一种天然中药，来源于中华大蟾蜍和黑框蟾蜍耳后及皮肤腺体分泌的浆液，是中药蟾酥（华蟾素）主要的地高辛样活性成分之一［1］。现已证实蟾蜍灵具有较强的抗肿瘤作用，对白血病细胞如 HL－60、K562、U937、ML－1、THP－1等也具有较强的分化及凋亡诱导作用［2－3］。本实验研究蟾蜍灵对K562细胞的凋亡诱导作用及对伊马替尼的增敏作用，以其对慢粒的治疗提供新的依据。

材料与方法

1 材 料 蟾蜍灵（Bufalin）购于美国Sigma公司，溶于无水乙醇，配制成终浓度为0．01mol／L的储存液，－20℃冻存。试验时用1640稀释，使乙醇终浓度控制在体积分数＜0．1%。人红白血病K562细胞系购自于西安交大第一附属医院中心实验室，培养在含体积分数为10%小牛血清的RPMI1640培养基中，在37℃、体积分数为5% 的CO2孵育箱中培养、传代，取对数生长期细胞进行实验。

2 方 法 MTT法：将K562细胞悬液调整为1×105／ml，接种于96孔板，每孔100ml，过夜后实验组分别加入不同浓度的蟾蜍灵，终浓度分别为0．025μmol／L、0．01μmol／L、0．05μmol／L、0．5μmol／L、1．0μmol／L和2．0μmol／L，对照组不加药，另设空白组（只有培养基，无细胞），每组3个复孔。将细胞分别分为蟾蜍灵组，蟾蜍灵＋伊马替尼2．0μmol／L、1．0μmol／L和0．5μmol／L 组，继续培养48h，加 MTT（5mg／ml）20ml，4h 后，离 心，弃 上 清，加 DMSO 200ml，避光震荡5min，用全自动酶标仪测490nm处的吸光度（A490）值。……