姜黄素（Curcumin）提纯自中药姜黄（Curcuma longa L．）的根茎，属于酚性色素，其化学名为阿魏酰甲烷（Difcruloylmethane）。中医认为姜黄具有祛风活血以及通络止痛等功效。从20世纪80年代至今，大量研究表明，姜黄素具有较强的抗肿瘤活性，可诱导肿瘤细胞凋亡［1－2］。近年研究表明，内质网应激（Endoplasmic Reticulum Stress，ERS）是有别于线粒体途径及死亡受体途径的可诱导细胞凋亡的独立通路。本研究采用姜黄素对宫颈癌HeLa细胞进行干预，探讨姜黄素是否能够通过ERS途径诱导HeLa细胞凋亡，为姜黄素的临床应用提供新的依据。

材料与方法

1 材 料 宫颈癌细胞株HeLa购自中国科学院细胞库；四甲基偶氮唑蓝（MTT）、姜黄素（C21H20O6，纯度≥98%）、ERS抑制剂4－苯基丁酸钠（4－PBA）购自美国Sigma－Aldrich公司；DMEM细胞培养基以及胎牛血清（FBS）购自美国Hyclone公司；Trizol总RNA提取试剂盒购自美国Invitrogen公司；Prime－Script RT Master Mix试剂盒以及SYBR Premix Ex TaqTMII试剂盒购自日本Takara公司；葡萄糖调节蛋白78（GRP78），C／EBP同源蛋白质（CHOP）以及β－Actin引物均由日本Takara公司合成；GRP78及CHOP抗体均购自美国Cell Signaling Technology公司；β－Actin抗体及辣根过氧化物酶标记二抗均购自美国Santa Cruz公司。

2 宫颈癌HeLa细胞培养 向DMEM培养基中加入10%FBS、0．1U／L链霉素以及0．1U／L青霉素制成细胞培养液对HeLa细胞进行培养。培养条件为37℃、饱和湿度以及5%CO2环境，隔天更换细胞培养液，细胞密度为80%以上时按照1∶3的比例对细胞进行传代，取处于对数生长期的HeLa细胞进行进一步试验。

3 MTT法检测姜黄素对HeLa细胞增殖的抑制作用 将HeLa细胞制成浓度为1×105／ml的细胞悬液，将该细胞悬液加入96孔板（GREINER，德国），共设6个平行孔，每孔加入100μl细胞悬液。6个平行孔中加入的姜黄素溶液（均由DMEM培养基配制）浓度分 别 为 0μmol／L（阴 性 对 照）、3．125μmol／L、6．25μmol／L、12．5μmol／L、25μmol／L 以及50μmol／L。……