大连大学生命科学与技术学院（大连116600） 董 爽 金 华 袁玉姣 蒋 革

腹腔粘连是腹部外科手术后常见的并发症之一，常导致腹部不适或持续疼痛、粘连性肠梗阻和不孕症等并发症，给患者带来极大的痛苦和经济损失［1］。粘连现象的形成主要是纤维蛋白的沉积超过纤维蛋白的溶解，在此过程中受多种生长因子和细胞因子参与调控，其中转化生长因子β1（TGF－β1）和肿瘤坏死因子α（TNF－α）的影响较大［2］。本研究观察透明质酸（HA）与羟乙基淀粉（HES）混合制备的新型防粘连剂对术后大鼠腹腔粘连的预防作用，并利用HE染色和免疫组化的方法观察粘连局部的TGF－β1和TNFα表达情况，并对HA－HES新型防粘连剂的防粘连机理进行探讨。

对象与方法

1 实验对象 体重200±20g的健康雄性SD大鼠20只，由大连医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（辽）2008－0002。

2 主要试剂及仪器 ①主要试剂：兔抗鼠多克隆TGF－β1抗体与兔抗鼠多克隆 TNF－a抗体、SABC免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒及HE染色试剂盒均购自武汉博士德生物技术公司。1×PBS缓冲液（pH7．2～7．4）购自上海生工生物工程有限公司。透明质酸与羧甲基纤维素（HA－CMC）防粘连剂（Guardix－sol）购自韩国韩美药品株式会社。②主要仪器：滑动切片机（金华市盖迪医疗设备厂，YD202A）、烘箱（上海精宏实验设备有限公司，DHG－9147A）、显微镜（NOVEL，N－800M）、冰箱（新飞 BCD－248EMC）、多功能生物显微 镜 （OLYMPUS BX51）、 微 波 炉 （Midea MM721NH1－PW）等。

3 实验方法 ①腹腔内粘连程度情况观察及评级：健康的雄性SD大鼠20只，随机分成4组：假性粘连组（5只）、生理盐水对照组（5只）、HA－CMC对照组（5只）和HA－HES实验组（5只）。麻醉后，开腹，找出盲肠部分，用干纱布反复轻轻擦拭至肠浆膜层受损面积为1．2cm×1．2cm，表现为表面有针尖大血点，纱布上出现淡红色。……